Biopolym. Cell. 1991; 7(4):104-108.
Клітинна біологія
Модельна система in vitro для вивчення репарації двонитчастих розривів ДНК екстрактами з вищих рослин
1Сітайло Л. О., 1Науменко В. Д., 1Макарова В. Г., 1Каневський І. Ф., 1Бубряк І. І.
  1. Інститут клітинної біології та генетичної інженерії АН УСРС
    Київ, СРСР

Abstract

Запропоновано модельну систему in vitro для вивчення репарації дволанцюгових розривів у ДНК за участю білкових екстрактів із вищих рослин. Система базується на дослідженні можливості гомологічної рекомбінації між двома лінійними фрагментами Д НК плазміди pUC19. Результатом проходження процесу рекомбінації є відновлення структурної цілісності гену IacZ плазміди pUC19 і як наслідок–блакитного забарвлення рекомбінантів, що ростуть в присутності ІПТГ та Z-gal. Дволанцюговий розрив у плазмідній ДНК моделювався за допомогою рестриктаз EcoRI і BglI. Обговорюються також можливі варіанти репарації в даній системі лігіюванням субстратів чи їх негомологічною рекомбінацією.

References

[1] Tarasov VA. Molecular mechanisms of repair and mutagenesis. M.: Nauka, 1982. 226 p.
[2] Zheyetyannikov VD. Genetics repair processes in microorganisms. Results of science and technology. VINITI, (Ser Mikrobiologiia, V. 15) 1985:5-149.
[3] Veleminsky J, Gichner T, Satava J. Reduction in the frequency of N-methyl-N-nitrosourea-induced somatic mutations in Tradescantia by pretreatment with low doses of alkylating agents. Mutat Res. 1983;122(2):229-34.
[4] Stepanyan NS, Seregina TB, Krupnova GF, Zhestyanikov VD. Recovery of cytogenetic damage in plant cells with unequal fractionation damaging action. II. Sparsely ionizing radiation effect. Tsitologiia. 1984;26(3):307-15.
[5] Rieger R, Michaelis A, Nicoloff H. Inducible repair processes in plant root tip meristems? “Below additivity effects” of unequally fractionated clastogen concentrations. Biol Zent Bl. 1982;101(1):125–38.
[6] Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab, 1982; 545 p.
[7] Hanahan D. Studies on transformation of Escherichia coli with plasmids. J Mol Biol. 1983;166(4):557-80.
[8] Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970;227(5259):680-5.
[9] Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem. 1976;72:248-54.