Biopolym. Cell. 2015; 31(3):200-208.
Молекулярна та клітинна біотехнології
Вплив супернатанту прогеніторних нейрогенних клітин щура на клітини гліоми 101.8 in vitro
1Любич Л. Д., 1Семенова В. М., 1Стайно Л. П.
  1. Інститут нейрохірургії ім. академіка А. П. Ромоданова АМН України
    вул. Мануїльського, 32, Київ, Україна, 04050

Abstract

Мета. Оцінити вплив супернатанту прогеніторних нейрогенних клітин (СНК) головного мозку щура на клітини перещеплюваної злоякісної гліоми головного мозку щура (штам 101.8) в умовах культивування. Методи. Первинні культури отримували з фрагментів гліоми 101.8 (n = 12) та головного мозку інтактних новонароджених щурів (n = 9). СНК отримували з суспензії нейрогенних клітин фетального мозку щурів на 8–11-у (Е8-11) та 12-16-у (Е12-16) добу гестації. Результати. СНК, отримані з фетального мозку як раннього (Е8-11), так і більш пізнього (Е12-16) терміну гестації, виявили цитотоксичну дію на короткострокові культури клітин гліоми 101.8, ступінь якої був дозозалежним та посилювався із збільшенням тривалості інкубації культур з СНК. СНК (Е12-16) виявив більш виражену цитотоксичну дію на культивовані клітини гліоми 101.8, порівняно з СНК (Е8-11). Показник цитотоксичного індексу (ЦІ) СНК (Е12-16) стосовно клітин гліоми 101.8 достовірно перевищував ЦІ, визначений у суспензіях клітин нормального мозку щура (ЦІ становив (91,99 ± 2,37) % та (22,9 ± 4,97) % відповідно через 48 год інкубації культур з СНК). Після впливу СНК (Е8-11) на первинні культури гліоми 101.8 спостерігались ознаки дозозалежної цитотоксичності: розрідження зони росту, поява дистрофічних та некробіотичних змін у пухлинних клітинах, зниження мітотичного індексу. Ці ознаки посилювались за умов впливу СНК(Е12-16). Висновки. СНК фетального мозку щура виявляє дозозалежний цитотоксичний та антипроліферативний вплив на культивовані клітини гліоми 101.8, який посилюється при збільшенні терміну гестації щура та тривалості інкубації культур з СНК. Передумовою такого впливу, ймовірно, є здатність НПК до продукції речовин з протипухлинною дією.
Keywords: прогеніторні нейрогенні клітини, фе­та­льний мозок щура, супернатант, гліома 101.8, ци­то­ток­сич­ний індекс, мітотичний індекс

References

[1] Ahmed AU, Ulasov IV, Mercer RW, Lesniak MS. Maintaining and loading neural stem cells for delivery of oncolytic adenovirus to brain tumors. Methods Mol Biol. 2012;797:97-109.
[2] Bovenberg MS, Degeling MH, Tannous BA. Advances in stem cell therapy against gliomas. Trends Mol Med. 2013;19(5):281-91.
[3] Kim SU. Neural stem cell-based gene therapy for brain tumors. Stem Cell Rev. 2011;7(1):130-40.
[4] Staflin K, Lindvall M, Zuchner T, Lundberg C. Instructive cross-talk between neural progenitor cells and gliomas. J Neurosci Res. 2007;85(10):2147-59.
[5] Klassen HJ, Imfeld KL, Kirov II, Tai L, Gage FH, Young MJ, Berman MA. Expression of cytokines by multipotent neural progenitor cells. Cytokine. 2003;22(3-4):101-6.
[6] Liu J, G?therstr?m C, Forsberg M, Samuelsson EB, Wu J, Calzarossa C, Hovatta O, Sundstr?m E, ?kesson E. Human neural stem/progenitor cells derived from embryonic stem cells and fetal nervous system present differences in immunogenicity and immunomodulatory potentials in vitro. Stem Cell Res. 2013;10(3):325-37.
[7] Chen HC, Ma HI, Sytwu HK, Wang HW, Chen CC, Liu SC, Chen CH, Chen HK, Wang CH. Neural stem cells secrete factors that promote auditory cell proliferation via a leukemia inhibitory factor signaling pathway. J Neurosci Res. 2010;88(15):3308-18.
[8] Lisyanyi NI, Oleynik GM, Markova OV, Semenova VM, Nosov AT The brain cells effect on tumors growth under the kidney capsule in vivo In.: The immune system of the brain Ed. by Lisyanyi N. I. Kyiv, VIPOL. 1999; 116–35.
[9] Grydina NYa, Semyonova VM, Stayno LP, Pogrebnoy PV, Markeeva NV, Shostak EA, Kavsan VM, Rozumenko VD. Transplantation influence of embryonic nervous tissue that contains genetically modified cells on rat glioma 101.8 growth. Transplantologia. 2004; 4:267–9.
[10] Lisyany NI, Lyubych LD, Hohlov AG. Study of progenitor neural cells (NC) antitumor action in experimental rat glioma. Immunol Allergol 2008; 3:61–6.
[11] Osterman LA. Methods for studying proteins and nucleic acids. Moskow: MCNMO, 2002. 248 p.
[12] Guidelines for the cultivation of neural tissue. Methods. Applicances. Problems. Eds. VP Bozhkova, LA Brezhe-stovsky, V Buravlev Moskow: Nauka, 1988. 318 p.
[13] Kaminska B, Kocyk M, Kijewska M. TGF beta signaling and its role in glioma pathogenesis. Adv Exp Med Biol. 2013;986:171-87.
[14] Zhang J, Yang W, Zhao D, Han Y, Liu B, Zhao H, Wang H, Zhang Q, Xu G. Correlation between TSP-1, TGF-? and PPAR-? expression levels and glioma microvascular density. Oncol Lett. 2014;7(1):95-100.
[15] Dubrovska AM, Souchelnytskyi SS. Low-density microarray analysis of TGF?1-dependent cell cycle regulation in human breast adenocarcinoma MCF7 cell line. Biopolym Cell. 2014; 30(2):107–17.
[16] Binder DK, Scharfman HE. Brain-derived neurotrophic factor. Growth Factors. 2004;22(3):123-31.