Biopolym. Cell. 1987; 3(6):307-312.
Генно-інженерна біотехнологія
Особливості клонування фрагментів rpoВС-оперону Escherichia coli у плазмідах pUC
1Патон Є. Б., 1Крупська І. В., 1Живолуп О. М.
  1. Інститут молекулярної біології і генетики АН УСРС
    Київ, СРСР

Abstract

На основі плазміди pUC19 і косміди pJC703 сконструйовано рекомбінантні плазміди з вбудованим BglII-фрагментом rpoВС-оперона Е. coli, що включає повні гени rplL, rplJ і rpoВ і ділянки генів rplA і rpoС. Сконструйовано рекомбінантнуплазміду pUC18 з вбудованим сильним промотором rpoBС-оперона ? PJ, а також рекомбінантні плазміди pUC18 і pUC19, що включають центральний фрагмент гена rpoВ довжиною 2870 пар основ. Визначено орієнтації клонованих фрагментів у рекомбінантних плазмідах. Передбачається, що орієнтацію BglII-фрагмента рJС703 при вбудовуванні його в плазміду pUC визначає його ділянка, що містить сильний промотор PJ.

References

[1] Meek DW, Hayward RS. Direct evidence for autogenous regulation of the Escherichia coli genes rpoBC in vivo. Mol Gen Genet. 1986;202(3):500-8.
[2] Yanisch-Perron C, Vieira J, Messing J. Improved M13 phage cloning vectors and host strains: nucleotide sequences of the M13mp18 and pUC19 vectors. Gene. 1985;33(1):103-19.
[3] Collins J. Deletions, insertions and rearrangements affecting rpoB gene expression. Mol Gen Genet. 1979;173(2):217-20.
[4] Zinder ND, Boeke JD. The filamentous phage (Ff) as vectors for recombinant DNA--a review. Gene. 1982;19(1):1-10.
[5] Miller JH. Experiments in Molecular Genetics. New York, Cold Spring Harbr Lab. Press, 1972; 466 p.
[6] Maniatis T., Fritsch E. F., Sambrook J. Molecular cloning - a laboratory manual. New York : Cold Spring Harbor. Lab. 1982. 545 p.
[7] Birnboim HC, Doly J. A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA. Nucleic Acids Res. 1979;7(6):1513-23.
[8] Clewell DB, Helinski DR. Supercoiled circular DNA-protein complex in Escherichia coli: purification and induced conversion to an opern circular DNA form. Proc Natl Acad Sci U S A. 1969;62(4):1159-66.
[9] Paton EB, Zhyvoloup AN, Varanitsa LA. The presence of two strong promoters determines the orientation of a DNA fragment inserted into pUC19 plasmid. Biopolym Cell. 1986; 2(4):217-9.
[10] Paton E. B., Zhyvoloup A. N. Chimeric rpoC'- lacZ' gene of the recombinant pUC19 plasmid reserving the B-galactosidase activity in Escherichia coli cells. Biopolym. Cell. 1987; 3(5):276-9.
[11] Messing J. New M13 vectors for cloning. Methods Enzymol. 1983;101:20-78.
[12] Stueber D, Bujard H. Transcription from efficient promoters can interfere with plasmid replication and diminish expression of plasmid specified genes. EMBO J. 1982;1(11):1399-404.
[13] Vidal-Ingigliardi D, Raibaud O. A convenient technique to compare the efficiency of promoters in Escherichia coli. Nucleic Acids Res. 1985;13(16):5919-26.
[14] Post LE, Strycharz GD, Nomura M, Lewis H, Dennis PP. Nucleotide sequence of the ribosomal protein gene cluster adjacent to the gene for RNA polymerase subunit beta in Escherichia coli. Proc Natl Acad Sci U S A. 1979;76(4):1697-701.
[15] Ovchinnikov YuA, Monastyrskaya GS, Gubanov VV, Guryev SO, Salomatina IS, Shuvaeva TM, Lipkin VM, Sverdlov ED. The primary structure of E. coli RNA polymerase, Nucleotide sequence of the rpoC gene and amino acid sequence of the beta'-subunit. Nucleic Acids Res. 1982;10(13):4035-44.
[16] Davanloo P, Rosenberg AH, Dunn JJ, Studier FW. Cloning and expression of the gene for bacteriophage T7 RNA polymerase. Proc Natl Acad Sci U S A. 1984;81(7):2035-9.
[17] Paton EB, Vudmaska MI, Sverdlov ED. Unidirectional orientation of the rpo B gene of E. coli cloned into filamentous M13mp8 and M13WB2348 phages. Bioorg Khim. 1984;10(11):1544-7.