Biopolym. Cell. 2004; 20(3):233-238.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.0006AA
Віруси та клітина
Очищення внутрішньоклітинного рекомбінантного пролактину людини, синтезованого в клітинах комах
1Строковська Л. І., 1Мелешко Р. А., 1Кіхно І. М., 1Соломко О. П.
  1. Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
    Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680

Abstract

Гормон пролактин людини (PRL) експресовано в клітинах культури комах, інфікованих бакуловірусами, що містятьк ДНК гена PRL під контролем промотору гена поліедрину вірусу ядерного поліедрозу Autographa califomica. Пролактин ексдресовано як 6 х His-зв'язаний білок і очищено за допомогою Со2+ -афінної хроматографії. Вихід чистого білка складав від 2 до 50 мг на І л культурального середовища залежно від виду клітин комах і умов їхнього культивування. Одержаний рекомбінантний PRL біологічно активний у системі тестування in vitro.
Повний текст: (PDF, російською)

References

[1] Strokovskaya LI, Kalinina NO, Kikhno IM, Solomko AP. The expression of recombinant human prolactin with use of the baculovirus vector on the basis of Malacosoma Neustria nuclear polyhedrosis virus. Dopovidi Nats Akad Nauk Ukrainy. 1997; (1):166-9.
[2] Strokovskaya LI, Kikhno IM, Meleshko RA. Structural and functional organization of baculovirus genome. Biopolym Cell. 2002; 18(1):3-12.
[3] Strokovskaya L, Bartoszewicz Z, Szolajska E, Kikhno I, Solomko A, Michalik J. Expression and one-step purification of intracellular human prolactin in insect cells. Protein Expr Purif. 2001; 22(2):242-8.
[4] Peterson FC, Anderson PJ, Berliner LJ, Brooks CL. Expression, folding, and characterization of small proteins with increasing disulfide complexity by a PT7-7-derived phagemid. Protein Expr Purif. 1999; 15(1):16-23.
[5] Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein dye binding. Anal Biochem. 1976;72:248-54.
[6] Gout PW, Beer CT, Noble RL. Prolactin-stimulated growth of cell cultures established from malignant Nb rat lymphomas. Cancer Res. 1980; 40(7):2433-6.
[7] Gout PW. Transient requirement for prolactin as a growth initiator following treatment of autonomous Nb2 node rat lymphoma cell cultures with butyrate. Cancer Res. 1987; 47(7):1751-5.
[8] Paris N, Rentier-Delrue F, Defontaine A, Goffin V, Lebrun JJ, Mercier L, Martial JA. Bacterial production and purification of recombinant human prolactin. Biotechnol Appl Biochem. 1990;12(4):436-49.
[9] Gilbert MS, Lowry PJ, Castro MG, Woods RJ, Savva D. Expression and partial purification of human prolactin in Escherichia coli. Int J Biochem. 1991; 23 (1):107-14.
[10] Bole-Feysot C, Goffin V, Edery M, Binart N, Kelly PA. Prolactin (PRL) and its receptor: Actions, signal transduction pathways and phenotypes observed in PRL receptor knockout mice. Endocrine Rev. 1998; 19 (3):225-68.
[11] Sinha YN. Structural variants of prolactin: Occurrence and physiological significance. Endocrine Rev. 1995; 16 (3):354-69.
[12] Lewis UJ, Singh RNP, Sinha YN, Vanderlaan WP. Glycosylated human prolactin. Endocrinology, 1985; 116(1):359-63.
[13] Smith CR, Norman MR. Prolactin and growth hormone: Molecular heterogeneity and measurement in serum. Ann Clin Biochem. 1990;27 (Pt 6):542-50.
[14] Andries M, Tilemans D, Denef C. Isolation of cleaved prolactin variants that stimulate DNA synthesis in specific cell types in rat pituitary cell aggregates in culture. Biochem J. 1992;281 ( Pt 2):393-400.
[15] Clapp C, Sears PS, Russell DH, Richards J, Levay-Young BK, Nicoll CS. Biological and immunological characterization of cleaved and 16K forms of rat prolactin. Endocrinology. 1988; 122(6):2892-8.