Biopolym. Cell. 1997; 13(5):416-418.
Генно-інженерна біотехнологія
Перенесення гена стійкості до гербіциду біалафосу в рослини гречки
1Рубцова М. О., 1Левенко Б. О., 1Тараненко Л. К., 1Стехін І. М., 1Заєць Л. І.
  1. Інститут фізіології рослин і генетики НАН України
    вул. Васильківська, 31/17, Київ, Україна, 03022

Abstract

Із Streptomyces hygroscopicus клонували bar-ген, який визначає стійкість до гербіціду біалафосу (фосфінотрицину). Ген під контролем 35S-промотора вірусу мозаїки цвітної капусти було введено у бінарний вектор рВin19 для трансформації рослин. Одержану рекомбінантну плазміду перенесено до шта­му 3850 Agrobacterium tumefaciens. Підібрано умови трансформації культурної гоечхи і міжвидового гібрида Fagopyrum esculentum х F. tatarium. Експланти гречки інокулювали агробактеріальним штамом, у якому bar-ген знаходиться на Тi плазміді поруч з NPTII геном. Здійснено молекулярно-біо­логічний аналіз восьми регенерантів, які пройшли канаміщновий відбір. П'ять рослин дали позитивну радіоавтогра­фічну відповідь при дот- і Саузерн-гібридизації з міченим зондом, який несе bar-ген, що свідчить про інтеграцію цього гена в геном рослин. Трансформовані рослини росли і утворю­вали коріння при концентрації гербіциди басти в середовищі, яке повністю пригнічувало нетрансформовані рослини,

References

[1] Botterman J, Leemans J. Engineering herbicide resistance in plants. Trends Genet. 1988;4(8):219-22.
[2] Greef WD, Delon R, Block MD, Leemans J, Botterman J. Evaluation of herbicide resistance in transgenic crops under field conditions. Bio/Technology. 1989;7(1):61–4.
[3] Block MD, Botterman J, Vandewiele M, Dockx J, Thoen C, Gossel? V, Movva NR, Thompson C, Montagu MV, Leemans J. Engineering herbicide resistance in plants by expression of a detoxifying enzyme. EMBO J. 1987;6(9):2513-8.
[4] Murakami T, Anzai H, Imai S, Satoh A, Nagaoka K, Thompson CJ. The bialaphos biosynthetic genes of Streptomyces hygroscopicus: Molecular cloning and characterization of the gene cluster. Mol Gen Genet. 1986;205(1):42–53.
[5] Piruzian ES, Mett VL, Kobets NS, Urmeeva FI. The use of bacterial genes encoding herbicide tolerance in constructing transgenic plants. Microbiol Sci. 1988;5(8):242-8.
[6] Devillard C. Transformation in vitro du tremble (Populus tremulo x PopuLis alba) par Agrobacterium rhizogenes et rege­ neration de plantes tolerantes au basta. C r Acad Sci Paris Biotechnol. 1922; 314:291-8.
[7] Greef WD, Delon R, Block MD, Leemans J, Botterman J. Evaluation of Herbicide Resistance in Transgenic Crops Under Field Conditions. Bio/Technology. 1989;7(1):61–4.
[8] Levenko BA, Stekhin IN, Zayaz AI, Melnik AI, Bileka AM, Bogomolova NM, Kornienko AV, Dyachenko LF, Koroleva IB. Introduction of glyphosate resistance gene in potato and sugar beet plants. Fiziologiia i biokhimiia kul'turnykh rasteniy. 1993; 25(2):197-200.
[9] Levenko BA, Mar'yushkin VF, Stekhin IN. et al. Obtaining soybean plants resistant to herbicide glyphosate. All Union 7th. Symp. "Trends in Plant Biotechnol". Moscow, 1991: 131.
[10] Yanisch-Perron C, Vieira J, Messing J. Improved M13 phage cloning vectors and host strains: nucleotide sequences of the M13mp18 and pUC19 vectors. Gene. 1985;33(1):103-19.
[11] Fromm ME, Taylor LP, Walbot V. Stable transformation of maize after gene transfer by electroporation. Nature. 1986 Feb 27-Mar 5;319(6056):791-3.
[12] Draper Scoti R, Armitage P. Plant genetic transformation and gene expression. Oxford, 1988: 8-62.
[13] Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab, 1982; 545 p.
[14] Rubtsova MA, Levenko BA, Taranenko LK, Shapoval AI, Yanchuk RM. Obtaining of interspecies hybrids between Fagopyrum esculentum and F. tataricum via embryo culture. Fiziologiia i biokhimiia kul'turnykh rasteniy. 1994; 26(6):563-6.