Biopolym. Cell. 1996; 12(5):93-99.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.00044F
Клонування та надекспресія фрагмента гена структурного білка El штама Ші-Минь вірусу класичної чуми свиней в Escherichia coli
1Кириленко С. Д., 2Дерябін О. М., 1Кириленко О. Л., 2Дерябіна О. Г., 3Бусол В. О.
  1. Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
    Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680
  2. Інститут ветеринарної медицини НААН України
    Вул. Донецька, 30, Київ, Україна, 03151
  3. Інститут експериментальної і клінічної ветеринарної медицини УААН
    вул. Пушкінська, 83, Харків, Україна, 61023

Abstract

З використанням зворотньо-транскриптазної полімеразної ланцюгової реакції клоновано та секвеновано фрагмент гена білка Е1 вірулентного штама Ші-Минь вірусу класичної чуми свиней довжиною 775 пар нуклеотидів. Отримано експресію цього фрагмента в Е. coli у вигляді злитого з глутатіон-й-трансферазою білка. Молекулярна маса частини білка E1 збігалася з розрахованою теоретично та становила близько 31 к Да. Рекомбінантний білок знаходився головним чином у нерозчинній фракції, його кількість становила до 15% від загального білка клітини. Обговорюються можливості застосування отриманого рекомбінантного білка.
Повний текст: (PDF, українською)

References

[1] Collett MS, Anderson DK, Retzel E. Comparisons of the pestivirus bovine viral diarrhoea virus with members of the flaviviridae. J Gen Virol. 1988;69 ( Pt 10):2637-43.
[2] Collett MS, Moennig V, Horzinek MC. Recent advances in pestivirus research. J Gen Virol. 1989;70 ( Pt 2):253-66.
[3] Moormann RJ, Warmerdam PA, van der Meer B, Schaaper WM, Wensvoort G, Hulst MM. Molecular cloning and nucleotide sequence of hog cholera virus strain Brescia and mapping of the genomic region encoding envelope protein E1. Virology. 1990;177(1):184-98.
[4] Van Rijn PA, Bossers A, Terpstra C. et al. A deletion subunit vaccine against classical swine fever virus and accompanying diagnostic test based on envelope glycoprotein El. Abstr. Third Congr. Eur. Soc. Vet. Virol. Interlaken, 1994. W3-7.
[5] Greiser-Wilke I, Moennig V, Coulibaly CO, Dahle J, Leder L, Liess B. Identification of conserved epitopes on a hog cholera virus protein. Arch Virol. 1990;111(3-4):213-25.
[6] Moser C, Ruggli N, Tratschin JD, Hofmann AT. A. Detection of antibodies against classical swine fever virus in swine sera by indirect ELISA using recombinant envelope glycoprotein E2. Immunobiology of viral infections. Proc. 3rd Congr. Eur. Soc. Vet. Virol. Interlaken, 1994: 327-330.
[7] Rasschaert D. Etude d'un coronavirus, le virus de la gastro-enterite transmissible du pore: identification des genes structuraux et non-structuraux et localization d'un site antigenique majeur sur la sequence de la glycoproteine de spicule E2. These de docteur en sciences. Paris, 1988: 18.
[8] Saiki RK, Bugawan TL, Horn GT, Mullis KB, Erlich HA. Analysis of enzymatically amplified beta-globin and HLA-DQ alpha DNA with allele-specific oligonucleotide probes. Nature. 1986 Nov 13-19;324(6093):163-6.
[9] Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T. Molecular cloning. A laboratory manual. The second edition. New York: Cold Spring Harbor Lab., 1989 p.
[10] Birnboim HC, Doly J. A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA. Nucleic Acids Res. 1979;7(6):1513-23.
[11] Nishimura A, Morita M, Nishimura Y, Sugino Y. A rapid and highly efficient method for preparation of competent Escherichia coli cells. Nucleic Acids Res. 1990;18(20):6169.
[12] Hojman F. A novel electrophoretic strategy allows detection of very low amounts of circular retroviral DNA by PCR. Meth Mol Cell Biol. 1990; 2: 66-9.
[13] Sanger F, Nicklen S, Coulson AR. DNA sequencing with chain-terminating inhibitors. Proc Natl Acad Sci U S A. 1977;74(12):5463-7.
[14] Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970;227(5259):680-5.
[15] Classical swine fever virus and related infections. Ed. B. Liess. Boston: Martinus Nijhoff Publ, 1988.
[16] Kyrylenko SD, Deriabin OM, Troianovs'ky? BM, Deriabina OH, Kyrylenko OL, Sozinov OO. A comparative phylogenetic analysis of the coding portion of the genes for structural protein E1 in the Shi-Min' strain and in other strains of the classic hog cholera virus. Tsitol Genet. 1997;31(3):54-60.
[17] Seroude L, Cribbs DL. Differential effects of detergents on enzyme and DNA-binding activities of a glutathione S-transferase-homeo-domain fusion protein. Nucleic Acids Res. 1994;22(20):4356-7.
[18] Yasukawa T, Kanei-Ishii C, Maekawa T, Fujimoto J, Yamamoto T, Ishii S. Increase of solubility of foreign proteins in Escherichia coli by coproduction of the bacterial thioredoxin. J Biol Chem. 1995;270(43):25328-31.
[19] van Rijn PA, Miedema GK, Wensvoort G, van Gennip HG, Moormann RJ. Antigenic structure of envelope glycoprotein E1 of hog cholera virus. J Virol. 1994;68(6):3934-42.
[20] Weiland E, Stark R, Haas B, R?menapf T, Meyers G, Thiel HJ. Pestivirus glycoprotein which induces neutralizing antibodies forms part of a disulfide-linked heterodimer. J Virol. 1990;64(8):3563-9.