Biopolym. Cell. 1991; 7(3):31-35.
Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) для діагностики вірусної інфекції: цитомегаловірус людини
1Виноградська Г. Р., 1Горишин І. Ю., 2Новікова Л. М., 3Плуталов О. В., 2Башмакова М. О., 3Берлін Ю. А., 4Цинзерлінг В. А., 3Шварц Є. І., 1Ланцов В. О.
  1. Ленінградський інститут ядерної фізики ім. Б. П. Константинова АН СРСР
    Гатчина, Ленінградська обл., СРСР
  2. Інститут акушерства та гінекології АМН ім. Д. О. Отта
    Ленінград, СРСР
  3. Інститут біоорганічної хімії ім. М. М. Шемякіна АН СРСР
    Москва, СРСР
  4. Ленінградський педіатричний медичний інститут МОЗ РРФСР
    Ленінград, СРСР
Описана процедура швидкого, чутливого та точного визначення цитомегаловірусу (ЦМВ) у тканинах і біологічних рідинах людини за допомогою термофільної ДНК-полімерази Thermus thermophilus. Процедура складається з двох послідовних ПЦР. У першій реакції проходить 40 циклів (денатурація ДНК, ренатурація праймерів і ДНК-полімерізація), що виконуються з двома праймерами по 20 основ, консервативна послідовність яких узята із гену MIE (major immediate early) ЦМВ. Друга реакція включає від 20 до 50 циклів, що відповідають першим, але на основі 20-членних праймерів, які ампліфікують внутрішню частину фрагменту ДНК (останній намножений раніше). Кінцевий фрагмент виявляється при фарбуванні бромистим етидієм після електрофорезу в поліакриламідному гелі. Веріфікація потрібної смуги провадиться і на·основі рестрикційного аналізу. За допомогою плазміди рСМ5018, що несе ген MIE вірусу, показано, що пропонована процедура може виявляти такі малі кількості ДНК, як декілька (від 1 до 5) плазмідних молекул.