Biopolym. Cell. 1990; 6(1):100-103.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.000250
Короткі повідомлення
Порівняння ефективності використання раннього і пізнього промоторів фага Т7 для експресії гена β-галактозидази в Escherichia coli
1Глушакова Л. Г., 1Романовська О. Р., 1Кордюм В. А.
  1. Інститут молекулярної біології і генетики АН УСРС
    Київ, СРСР

Abstract

Створено модельну систему, що дозволяє порівняти ефективність використання раннього і пізнього промоторів фага Т7 для експресії beta-галактозидазного гена Е. coli. Обрано наступну стратегію конструювання. Ген PHК-полімерази фага Т7 клоновано у складі ДНК векторного фага lambda, Модельний ген lасz-оперону Е. coli (EcoRI-Sal1-фрагмент pLZ56) клоновано у складі ДНК комерційної плазміди GEM-I фірми «Promega» (USA), що містить пізній промотор фага Т7. У клонованому фрагменті збережені сайти зв'язування з рибосомами і промотор А3, ранній промотор фага Т7, специфічний для РНК- полімерази Е. coli. Наведено закономірності синтезу β-галактозидази при транскрипції z-гена як з пізнього промотора фага Т7, так і з промотора А3.
Повний текст: (PDF, російською)

References

[1] Tabor S, Richardson CC. A bacteriophage T7 RNA polymerase/promoter system for controlled exclusive expression of specific genes. Proc Natl Acad Sci U S A. 1985;82(4):1074-8.
[2] Studier FW, Moffatt BA. Use of bacteriophage T7 RNA polymerase to direct selective high-level expression of cloned genes. J Mol Biol. 1986;189(1):113-30.
[3] Moffatt BA, Dunn JJ, Studier FW. Nucleotide sequence of the gene for bacteriophage T7 RNA polymerase. J Mol Biol. 1984;173(2):265-9.
[4] Charnay P, Louise A, Fritsch A, Perrin D, Tiollais P. Bacteriophage lambda-E. coli K12 vector-host system for gene cloning and expression under lactose promoter control. II. DNA fragment insertion at the vicinity of the lac UV5 promoter. Mol Gen Genet. 1979;170(2):171-8.
[5] Davanloo P, Rosenberg AH, Dunn JJ, Studier FW. Cloning and expression of the gene for bacteriophage T7 RNA polymerase. Proc Natl Acad Sci U S A. 1984;81(7):2035-9.
[6] Fuerst TR, Niles EG, Studier FW, Moss B. Eukaryotic transient-expression system based on recombinant vaccinia virus that synthesizes bacteriophage T7 RNA polymerase. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83(21):8122-6.
[7] Miller D. Determination of lactose operon enzymes. Moscow, Mir, 1976; 436 p.
[8] Chernykh SI, Glushakova LG, Kordium VA. Phage-dependent beta-galactosidase synthesis by Escherichia coli cells. Mikrobiol Zh. 1979;41(5):479-83.
[9] Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab. press, 1982 545 p.
[10] Moir A, Brammar WJ. The use of specialised transducing phages in the amplification of enzyme production. Mol Gen Genet. 1976;149(1):87-99.
[11] Glushakova LG, Chernykh SI, Stel'mashenko LN, Kordium VA. Beta-galactosidase super synthesis induced by phage Xplac5cl857some amber-mutants. Molekulyarnaya biologiya (Kiev). 1982; Is. 30:37-41.