Biopolym. Cell. 1988; 4(5):269-272.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.000237
Короткі повідомлення
Індукована олігонуклеотидним субстратом димеризація ендодезоксирибонуклеази Mval
1Овечкина Л. Г., 1Попова С. Р., 1Зінов'єв В. В., 2Вайткявічюс Д. П., 2Янулайтіс А. А., 1Горбунов Ю. А., 1Малигін Е. Г.
  1. ВНДІ молекулярної біології
    сел. Кольцово Новосибірська обл., СРСР
  2. НВО «Фермент»
    Вільнюс, СРСР

Abstract

Методом електрофорезу за денатурувальних умов визначено молекулярну масу ендодезоксирибонуклеази MvaL. Показано, що досліджуваний білок складається з однієї субодиниці з молекулярною масою 31300 ± 400. Близькі значення отримано при ультрацентрифугуванні ферменту в градієнті концентрації сахарози і гель-фільтрації. За присутності олігонуклеотидного субстрату спостерігається збільшення молекулярної маси ферменту до 53000 ± 3000 Да, що пов’язано з димеризацією білка при утворенні фермент-субстратного комплексу.
Повний текст: (PDF, російською)

References

[1] Modrich P. Studies on sequence recognition by type II restriction and modification enzymes. CRC Crit Rev Biochem. 1982;13(3):287-323.
[2] Tuzikov FV, Zinov'ev VV, Iashina LN, Vavilin VI, Gorbunov IuA. Study of the substrate-induced changes in the state of Eco dam methylase using a method of small-angle x-ray scattering. Mol Biol (Mosk). 1986;20(4):1002-7.
[3] Hirose T, Crea R, Itakura K. Rapid synthesis of trideoxyribonucleotide blocks. Tetrahedron Lett. 1978; 17(28):2449-52.
[4] Butkus V, Klimasauskas S, Kersulyte D, Vaitkevicius D, Lebionka A, Janulaitis A. Investigation of restriction-modification enzymes from M. varians RFL19 with a new type of specificity toward modification of substrate. Nucleic Acids Res. 1985;13(16):5727-46.
[5] Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970;227(5259):680-5.
[6] Siegel LM, Monty KJ. Determination of molecular weights and frictional ratios of proteins in impure systems by use of gel filtration and density gradient centrifugation. Application to crude preparations of sulfite and hydroxylamine reductases. Biochim Biophys Acta. 1966;112(2):346-62.
[7] Herman GE, Modrich P. Escherichia coli dam methylase. Physical and catalytic properties of the homogeneous enzyme. J Biol Chem. 1982;257(5):2605-12.
[8] Martin RG, Ames BN. A method for determining the sedimentation behavior of enzymes: application to protein mixtures. J Biol Chem. 1961;236:1372-9.
[9] Ianulaitis AA, Vaitkyavichus DP. New methodological approach to the development of obtaining restriction endonucleases. Development allocation schemes homogeneous preparation of Mval restrictase. Biotekhnologiya. 1985;(1):39-51.
[10] Alves J. Mechanistische Untersuchungen zur Spaltung von Oligodesoxynucleotiden durch die Restriktionsendonuklease EcoRI. Hannover: Universitat Hannover, 1984. S. 16-24.
[11] Frankel AD, Ackers GK, Smith HO. Measurement of DNA-protein equilibria using gel chromatography: application to the HinfI restriction endonuclease. Biochemistry. 1985;24(12):3049-54.