Biopolym. Cell. 2023; 39(4):299-310.
Молекулярна Біомедицина
Ангіостатини модулюють рівень АСЕ2 і GFAP у пошкодженій рогівці щурів та не впливають на життєздатність клітин пігментного епітелію сітківки
1Білоус В. Л., 1Капустяненко Л. Г., 1Юсова О. І., 1Корса В. В., 2Недзвецький В. С., 3Агджа Дж. А., 4Зябліцев С. В., 1Тихомиров А. О.
  1. Інституту Біохімії імені В.П. Палладіна, НАН України
    9, вул. Леонтовича, Київ, Україна, 01054
  2. Дніпровський Державний Аграрно-Економічний Університет
    25, вул. Сергія Єфремова, Дніпро, Україна, 49027
  3. Університет Бінгель, Селахаддін-і Ейюбі Мах. Університет САПР. No: 1
    Бінгол, Туреччина, 12000
  4. Національний медичний університет імені О. О. Богомольця
    34, пр-т. Берестейський, Київ, Україна, 03057
Мета. Дослідити вплив AS K1-3 і K5 на рівень рецептору SARS-CoV-2 протеїну ACE2 та маркеру активованої сателітної глії GFAP у пошкодженій рогівці щурів і визначити потенційні ефекти AS на життєздатність клітин пігментного епітелію сітківки (RPE). Методи. AS K1-3 і K5 були отримані шляхом обмеженого протеолізу плазміногену, ізольованого з плазми людини, з подальшим очищенням за допомогою афінної хроматографії. AS (K1-3 0,1 або 1,0 мкМ, K5 0,1 мкМ) застосовували місцево у вигляді очних крапель у створеній моделі лужного опіку рогівки щурів. Рівні протеїнів ACE2 і GFAP визначали в лізатах тканини рогівки за допомогою вестерн-блоту та виражали в умовних одиницях (у.о.). Вплив AS на життєздатність клітин RPE оцінювали за допомогою МТТ-тесту. Результати. Пошкодження поверхні ока, спричинене лужним опіком, призвело до надмірної експресії як ACE2 (у 7,7 разів порівняно з контролем, P<0,001), так і GFAP (у 62 рази порівняно з контролем, P<0,001). Застосування K5 або K1-3 (1,0 мкМ) сприяло зниженню вмісту ACE2 в ушкодженій рогівці вдвічі (P<0,05 порівняно з групою Опік), тоді як K1-3 (0,1 мкМ) знижував вміст ACE2 у 3,4 рази порівняно з групою Опік (P<0,05), що свідчить про здатність AS зменшувати потенційний ризик проникнення SARS-CoV-2 завдяки зниженню експресії його рецептору. Слід зазначити, що K5 виявив більш виражену здатність інгібувати надекспресію GFAP (у 10,9 разів порівняно з групою Опік, P<0,01), що свідчить на користь реалізації AS нейропротекторних властивостей через пригнічення надмірної активації сателітної глії в пошкодженій рогівці. AS не володіють цитотоксичною дією на клітини пігментного ендотелію сітківки в діапазоні концентрацій 2-100 нМ. Висновки. Дані, отримані у представленій роботі, вказують на перспективи застосування AS для розробки ефективних та безпечних офтальмологічних препаратів з комплексними захисними властивостями.
Keywords: ангіостатини, пошкодження рогівки, ACE2, GFAP, клітини RPE, , , , ,