Biopolym. Cell. 2022; 38(4):224-230.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.000A83
Молекулярна та клітинна біотехнології
Отримання та культивування МСК-подібної популяції з амніотичної оболонки кроля
1Мінін Ю. В., 1, 2Шувалова Н. С., 2Дерябіна О. Г., 1Кучеренко Т. І., 1Чайка С. П.
  1. ДУ "Інститут отоларингології ім. проф. О.С.Коломійченка НАМН України"
    ул. Зоологическая, 3, Киев, Украина, 02000
  2. ДУ «Інститут генетичної і регенеративної медицини НАМН України»
    вул. Вишгородська, 67, Київ, Україна, 04114

Abstract

Незважаючи на переваги вивчення терапевтичного потенціалу аутологічних і алогенних мезенхімальних стовбурових клітин (МСК) на кролячих моделях, культивування МСК кролячого амніону не описано в науковій літературі. Мета. Вивчення можливості виділення, розмноження та кріоконсервації МСК, отриманих з амніону кроля. Методи. Амніотичну оболонку кроля було отримано хірургічним шляхом. Для отриманя первинної культури було перевірено ферментативний метод, та метод експлантів. Отримані первинні культури пересівали, вивчали їх проліфераційну здатність і морфологічні характеристики. Результати. Життєздатні клони було отримано на другу добу культивування ферментативним методом. На всіх пасажах клітини мали адгезію до культурального пластику та фібробластоподібну морфологію. На першому та другому пасажах через 7 діб культивування популяція подвоювалась 4,4 та 4,3 рази відповідно. Оцінка життєздатності клітин після кріоконсервації показала, що після розморожування більше 90 % клітин були живими, а за 7 днів культивування відбулося 4,3 подвоєння. Під час культивування не було виявлено клітин з атиповим фенотипом. Висновки. Оптимізовано методи отримання, мультиплікації та кріоконсервації МСК-подібних клітин амніону кроля. Це може стати основою для подальших досліджень їх характеристик і регенеративного потенціалу.
Keywords: амніон кроля, МСК, первинна культура
Повний текст: (PDF, англійською)

References

[1] Taghizadeh RR, Cetrulo KJ, Cetrulo CL. Wharton's jelly stem cells: future clinical applications. Placenta. 2011;32 Suppl 4:S311-5.
[2] Saeedi P, Halabian R, Imani Fooladi AA. A revealing review of mesenchymal stem cells therapy, clinical perspectives and modification strategies. Stem Cell Investig. 2019;6:34.
[3] Li KD, Wang Y, Sun Q, Li MS, Chen JL, Liu L. Rabbit umbilical cord mesenchymal stem cells: A new option for tissue engineering. J Gene Med. 2021;23(1):e3282.
[4] Dobreva MP, Pereira PN, Deprest J, Zwijsen A. On the origin of amniotic stem cells: of mice and men. Int J Dev Biol. 2010;54(5):761-77.
[5] Hinko A, Soloff MS. Characterization of oxytocin receptors in rabbit amnion involved in the production of prostaglandin E2. Endocrinology. 1992;130(6):3547-53.
[6] Papadopulos NA, Klotz S, Raith A, Foehn M, Schillinger U, Henke J, Kovacs L, Horch RE, Biemer E. Amnion cells engineering: a new perspective in fetal membrane healing after intrauterine surgery? Fetal Diagn Ther. 2006;21(6):494-500.
[7] Ganjibakhsh M, Aminishakib P, Farzaneh P, Karimi A, Fazeli SAS, Rajabi M, Nasimian A, Naini FB, Rahmati H, Gohari NS, Mohebali N, Asadi M, Gorji ZE, Izadpanah M, Moghanjoghi SM, Ashouri S. Establishment and characterization of primary cultures from iranian oral squamous cell carcinoma patients by enzymatic method and explant culture. J Dent (Tehran). 2017;14(4):191-202.
[8] Yoon JH, Roh EY, Shin S, Jung NH, Song EY, Chang JY, Kim BJ, Jeon HW. Comparison of explant-derived and enzymatic digestion-derived MSCs and the growth factors from Wharton's jelly. Biomed Res Int. 2013;2013:428726.
[9] Pirjali T, Azarpira N, Ayatollahi M, Aghdaie MH, Geramizadeh B, Talai T. Isolation and characterization of human mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord Wharton's jelly and amniotic membrane. Int J Organ Transplant Med. 2013;4(3):111-6.
[10] Dominici M, Le Blanc K, Mueller I, Slaper-Cortenbach I, Marini F, Krause D, Deans R, Keating A, Prockop Dj, Horwitz E. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy. 2006;8(4):315-7.