Biopolym. Cell. 2018; 34(3):196-206.
Молекулярна та клітинна біотехнології
Удосконалене відновлення і кріозбереження сперматогоній щурів для створення банку чоловічих стовбурових клітин
1Сивик Т. Л., 1Дяченко Л. С., 2Сивик А. Є.
  1. Білоцерківський Національний аграрний університет
    Соборна площа,8/1, Біла Церква, Україна, 09117
  2. Blinn College
    902 College Ave, Бреннем, США, 77833
Мета. Оптимізувати кріоконсервуючий розчин для сперматогонії і процедуру її відновлення. Методи. ПЛР, Тест на виживання клітин, Тест на формування сперматогональних колоний, імуноцитохімія, кріоконсервація и розморожування сперматогонії. Результати. Три мутовані сперматогональні стовбурові клітинні лінії Спляча Красуня після 17–24 місяців кріоконсервації були відновлені двома методами: традиційним – із застосуванням ламінінової селекції і новим методом селекції ССК у живильному середовищі на мишачих ембріональних фібробластах. Мутовані лінії ССК, відновлені двома методами, трансплантували у сім'яники самців-реципиєнтів. Були отримані трансгенні нащадки. Ми вдосконалили концентрацію ДМСО в розчині для заморожування ліній ССК. Висновки. Після виділення ССК із сім'янників щура і тривалого кріозбереження, оптимізована процедура відновлення їх у живильному середовищі дозволяє успішно отримувати трансгенні тварини із банку мутованих ліній ССК. Результати доводять доцільність включення 8 % ДМСО до складу живильного середовища для ССК з метою кріоконсервування.
Keywords: сперматогональні стовбурові клітини, мутовані лінії, ламінінова селекція, кріоконсервація