Biopolym. Cell. 2017; 33(3):172-182.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.000953
Структура та функції біополімерів
Роль експонованого актину у зв’язуванні плазміногену на мембрані агоніст-активованих тромбоцитів: цитометричне дослідження
1Тихомиров А. О., 1Жерносєков Д. Д., 1Гриненко Т. В.
  1. Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України
    вул. Леонтовича, 9, Київ, Україна, 01601

Abstract

Мета. З’ясувати здатність актину, що експонується на поверхні тромбоцитів, активованих різними агоністами, зв’язувати плазміноген. Методи. Відмиті тромбоцити людини отримували за допомогою гель-фільтрації на Сефарозі-2В. Кількісну оцінку експонування актину на зовнішній поверхні інтактних тромбоцитів та тромбоцитів, активованих тромбіном або колагеном, проводили із застосуванням протокової цитометрії. Зв’язування флуоресцентного кон’югату плазміноген-FITC (Pg-FITC) з тромбоцитами, обробленими антитілами проти актину або неімунними IgG (контроль), аналізували цитометрично. Результати. Вплив тромбіну та колагену призводить до появи на зовнішньому боці плазматичної мембрани тромбоцитів актину, кількість якого залежала від концентрації агоністів. Попередня обробка активованих тромбоцитів специфічними антитілами проти актину значно запобігала зв’язуванню Pg-FITC з поверхнею тромбоцитів. Висновки. Результати представленого дослідження вказують на залучення експонованого актину до зв’язування плазміногену на поверхні тромбоцитів, стимульованими різними агоністами.
Keywords: тромбоцити, експонований актин, плазміноген, протокова цитометрія
Повний текст: (PDF, англійською)

References

[1] Yun SH, Sim EH, Goh RY, Park JI, Han JY. Platelet activation: the mechanisms and potential biomarkers. Biomed Res Int. 2016;2016:9060143.
[2] Tschoepe D, Spangenberg P, Esser J, Schwippert B, Kehrel B, Roesen P, Gries FA. Flow-cytometric detection of surface membrane alterations and concomitant changes in the cytoskeletal actin status of activated platelets. Cytometry. 1990;11(5):652-6.
[3] Podor TJ, Singh D, Chindemi P, Foulon DM, McKelvie R, Weitz JI, Austin R, Boudreau G, Davies R. Vimentin exposed on activated platelets and platelet microparticles localizes vitronectin and plasminogen activator inhibitor complexes on their surface. J Biol Chem. 2002;277(9):7529-39.
[4] Tykhomyrov AA. Dynamics of thrombin-induced exposition of actin on the platelet surface. Ukr Biochem J. 2014;86(5):74-81.
[5] Castellino FJ, Ploplis VA. Structure and function of the plasminogen/plasmin system. Thromb Haemost. 2005;93(4):647-54.
[6] Whyte CS, Swieringa F, Mastenbroek TG, Lionikiene AS, Lancé MD, van der Meijden PE, Heemskerk JW, Mutch NJ. Plasminogen associates with phosphatidylserine-exposing platelets and contributes to thrombus lysis under flow. Blood. 2015;125(16):2568-78.
[7] Wang H, Doll JA, Jiang K, Cundiff DL, Czarnecki JS, Wilson M, Ridge KM, Soff GA. Differential binding of plasminogen, plasmin, and angiostatin4.5 to cell surface beta-actin: implications for cancer-mediated angiogenesis. Cancer Res. 2006;66(14):7211-5.
[8] Miles LA, Hawley SB, Parmer RJ. Chromaffin cell plasminogen receptors. Ann N Y Acad Sci. 2002;971:454-9.
[9] Sudakov NP, Klimenkov IV, Byvaltsev VA, Nikiforov SB, Konstantinov YM. Extracellular actin in health and disease. Biochemistry (Mosc). 2017;82(1):1-12.
[10] Tykhomyrov AA. Interaction of actin with plasminogen/plasmin system: mechanisms and physiological role. Biopolym Cell. 2012;28(6):413-23.
[11] Smalheiser NR. Proteins in unexpected locations. Mol Biol Cell. 1996;7(7):1003-14.
[12] Liu DY, Clarke GN, Baker HW. Exposure of actin on the surface of the human sperm head during in vitro culture relates to sperm morphology, capacitation and zona binding. Hum Reprod. 2005;20(4):999-1005.
[13] Miles LA, Andronicos NM, Baik N, Parmer RJ. Cell-surface actin binds plasminogen and modulates neurotransmitter release from catecholaminergic cells. J. Neurosci. 2006;26(50):13017-24.
[14] Wang H, Schultz R, Hong J, Cundiff DL, Jiang K, Soff GA. Cell surface-dependent generation of angiostatin4.5. Cancer Res. 2004;64(1):162-8.
[15] Deutsch DG, Mertz ET. Plasminogen: purification from human plasma by affinity chromatography. Science. 1970;170(3962):1095-6.
[16] Magalhães V, Andrade EB, Alves J, Ribeiro A, Kim KS, Lima M, Trieu-Cuot P, Ferreira P. Group B streptococcus hijacks the host plasminogen system to promote brain endothelial cell invasion. PLoS One. 2013; 8(5):63244.
[17] Schoenfeld H, Muhm M, Doepfmer U, Exadaktylos A, Radtke H. Platelet activity in washed platelet concentrates. Anesth. Analg. 2004; 99(1): 17-20.
[18] Takada Y. Potential role of kringle-integrin interaction in plasmin and uPA actions (a hypothesis). J Biomed Biotechnol. 2012;2012:136302.
[19] Dudani AK, Ben-Tchavtchavadze M, Porter S, Tackaberry E. Angiostatin and plasminogen share binding to endothelial cell surface actin. Biochem Cell Biol. 2005;83(1):28-35.
[20] Sanders S.K., Craig S.W. A lymphocyte cell surface molecule that is antigenically related to actin. J Immunol. 1983;131(1):370-7.
[21] Li GH, Arora PD, Chen Y, McCulloch CA, Liu P. Multifunctional roles of gelsolin in health and diseases. Med Res Rev. 2012;32(5):999-1025.
[22] Hansen MH, Nielsen HV, Ditzel HJ. Translocation of an intracellular antigen to the surface of medullary breast cancer cells early in apoptosis allows for an antigen-driven antibody response elicited by tumor-infiltrating B cells. J Immunol. 2002;169(5):2701-11.
[23] Head BP, Patel HH, Insel PA. Interaction of membrane/lipid rafts with the cytoskeleton: impact on signaling and function: membrane/lipid rafts, mediators of cytoskeletal arrangement and cell signaling. Biochim Biophys Acta. 2014;1838(2):532-45.
[24] Bearer EL, Prakash JM, Li Z. Actin dynamics in platelets. Int Rev Cytol. 2002;217:137-82.
[25] Law RH, Abu-Ssaydeh D, Whisstock JC. New insights into the structure and function of the plasminogen/plasmin system. Curr Opin Struct Biol. 2013;23(6):836-41.
[26] Tykhomyrov A, Zhernosiekov D, Roka-Moĭia I, Diordiieva S, Hrynenko T. Effects of Lys-form of plasminogen on platelet actin cytoskeleton. Fiziol Zh. 2014;60(1):25-33.
[27] Tykhomyrov A, Zhernosekov D, Roka-Moya Y, Diordieva S, Grinenko T. The effects of lys-plasminogen on human platelet secretion. Fiziol Zh. 2015;61(6):26-34.
[28] Zhernossekov D, Roka-Moiia Y, Tykhomyrov A, Guzyk M, Grinenko T. Glu- and Lys-forms of plasminogen differentially affect phosphatidylserine exposure on the platelet surface. Ukr Biochem J. 2017;89(special issue):102-10.
[29] Miles LA, Castellino FJ, Gong Y. Critical role for conversion of glu-plasminogen to Lys-plasminogen for optimal stimulation of plasminogen activation on cell surfaces. Trends Cardiovasc Med. 2003;13(1):21-30.
[30] Radziwon-Balicka A, Moncada de la Rosa C, Zielnik B, Doroszko A, Jurasz P. Temporal and pharmacological characterization of angiostatin release and generation by human platelets: implications for endothelial cell migration. PLoS One. 2013;8(3):e59281.