Biopolym. Cell. 2015; 31(3):187-192.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.0008DF
Структура та функції біополімерів
Отримання та характеристика моноклональних антитіл, специфічних до КоА
1Маланчук О. М., 1Панасюк Г. Г., 1Сербин Н. М., 2Гут І. Т., 1Філоненко В. В.
  1. Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
    Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680
  2. Інститут структурної та молекулярної біології, Університетський коледж Лондона
    вул. Гавер, Лондон, WC1E 6BT, Велика Британія

Abstract

Ціль. Отримати та охарактеризувати моноклональні антиті­ла, специфічні до КоА. Методи. Гібридомна технологія. Для імунізації було використано КоА, кон’югований з білком-носієм KLH. Скринінг позитивних клонів проводили з використанням БСА, кон’югованого з КоА. Результати. От­римано моноклональні антитіла, що специфічно розпізнають КоА та КоА-похідні та не розпізнають його попередників – АТФ та цистеїну. Висновки. Вперше описано створення та характеристику моноклональних антитіл проти КоА. Моноклональні антитіла 1F10 специфічно розпізнають КоА в Вестерн блотингу, ІФА та імунопреципітації. Такі властивості антитіл вказують на перспективність використання для аналізу функцій КоА в нормі та за патологій.
Keywords: КоА, гібридомна технологія, мо­но­кло­на­ль­ні ан­титіла
Повний текст: (PDF, англійською)

References

[1] Shi L, Tu BP. Protein acetylation as a means to regulate protein function in tune with metabolic state. Biochem Soc Trans. 2014;42(4):1037-42.
[2] Smith CM, Cano ML, Potyraj J. The relationship between metabolic state and total CoA content of rat liver and heart. J Nutr. 1978;108(5):854-62.
[3] Smith CM, Savage CR Jr. Regulation of coenzyme A biosynthesis by glucagon and glucocorticoid in adult rat liver parenchymal cells. Biochem J. 1980;188(1):175-84.
[4] Leonardi R, Zhang YM, Rock CO, Jackowski S. Coenzyme A: back in action. Prog Lipid Res. 2005;44(2-3):125-53.
[5] Perry RJ, Camporez JP, Kursawe R, Titchenell PM, Zhang D, Perry CJ, Jurczak MJ, Abudukadier A, Han MS, Zhang XM, Ruan HB, Yang X, Caprio S, Kaech SM, Sul HS, Birnbaum MJ, Davis RJ, Cline GW, Petersen KF, Shulman GI. Hepatic acetyl CoA links adipose tissue inflammation to hepatic insu­lin resistance and type 2 diabetes. Cell. 2015;160(4):745–58.
[6] Kamphorst JJ, Chung MK, Fan J, Rabinowitz JD. Quantitative analysis of acetyl-CoA production in hypoxic cancer cells reveals substantial contribution from acetate. Cancer Metab. 2014;2:23.
[7] Schug ZT, Peck B, Jones DT, Zhang Q, Grosskurth S, Alam IS, Goodwin LM, Smethurst E, Mason S, Blyth K, McGarry L, James D, Shanks E, Kalna G, Saunders RE, Jiang M, Howell M, Lassailly F, Thin MZ, Spencer-Dene B, Stamp G, van den Broek NJ, Mackay G, Bulusu V, Kamphorst JJ, Tardito S, Strachan D, Harris AL, Aboagye EO, Critchlow SE, Wa­ke­lam MJ, Schulze A, Gottlieb E. Acetyl-CoA synthetase 2 pro­motes acetate utilization and maintains cancer cell growth under metabolic stress. Cancer Cell. 2015;27(1):57–71.
[8] Huang J, Xu L, Huang Q, Luo J, Liu P, Chen S, Yuan X, Lu Y, Wang P, Zhou S. Changes in short-chain acyl-coA dehydrogenase during rat cardiac development and stress. J Cell Mol Med. 2015;19(7):1672-88.
[9] Kolwicz SC Jr, Olson DP, Marney LC, Garcia-Menendez L, Synovec RE, Tian R. Cardiac-specific deletion of acetyl CoA carboxylase 2 prevents metabolic remodeling during pressure-overload hypertrophy. Circ Res. 2012;111(6):728-38.
[10] Abo Alrob O, Lopaschuk GD. Role of CoA and acetyl-CoA in regulating cardiac fatty acid and glucose oxidation. Biochem Soc Trans. 2014;42(4):1043-51.
[11] Naquet P, Pitari G, Dupr? S, Galland F. Role of the Vnn1 pantetheinase in tissue tolerance to stress. Biochem Soc Trans. 2014;42(4):1094-100.
[12] Jackowski S, Leonardi R. Deregulated coenzyme A, loss of metabolic flexibility and diabetes. Biochem Soc Trans. 2014;42(4):1118-22.
[13] Colombelli C, Aoun M, Tiranti V. Defective lipid metabolism in neurodegeneration with brain iron accumulation (NBIA) syndromes: not only a matter of iron. J Inherit Metab Dis. 2015;38(1):123-36.
[14] Hayflick SJ. Defective pantothenate metabolism and neurodegeneration. Biochem Soc Trans. 2014;42(4):1063-8.
[15] Venco P, Dusi S, Valletta L, Tiranti V. Alteration of the coenzyme A biosynthetic pathway in neurodegeneration with brain iron accumulation syndromes. Biochem Soc Trans. 2014;42(4):1069-74.
[16] Tsuchiya Y, Pham U, Gout I. Methods for measuring CoA and CoA derivatives in biological samples. Biochem Soc Trans. 2014;42(4):1107-11.
[17] Harlow E, Lane D. Antibodies: a laboratory manual. Cold Spring Harbor Lab Press, 1998. 726 p.