Biopolym. Cell. 2015; 31(3):174-178.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.0008DD
Структура та функції біополімерів
Ідентифікація оксиду азоту в мітохондріях міоцитів матки
1Данилович Ю. В., 1Карахім С. О., 1Коломієць О. В., 1Данилович Г. В., 1Костерін С. О.
  1. Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України
    вул. Леонтовича, 9, Київ, Україна, 01601

Abstract

Мета. Продемонструвати можливість синтезу NO в інтактних міоцитах матки щурів. Методи. Конфокальна скануюча мікроскопії, NO-чутливий флуоресцентний зонд DAF-FM, MitoTracker Orange CM-H2TMRos. Результати. Показано базальну продукцію NO в інтактних міоцитах за допомогою флуоресцентного зонду DAF-FM. Внаслідок інкубації клітин з донором NO нітропрусидом натрію (SNP) спостерігалось зростання флуоресцентного сигналу DAF-FM-T. І навпаки, внесення інгібітора NO-синтази – N-нітро-L-аргініну (NA) – призводило до гасіння флуоресценції. Доведено колокалізацію флуоресцентного мітохондріального маркеру MitoTracker Orange CM-H2TMRos та NO-чутливого зонду DAF-FM. Висновки. Вперше показано наявність NO в гладеньком’язових клітинах матки, і зокрема в мітохондріях, із залученням методу лазерної конфокальної мікроскопії, NO-чутливого зонду DAF-FM та специфічного маркеру функціонально активних мітохондрій MitoTracker Orange CM-H2TMRos.
Keywords: оксид азоту, міометрій, DAF-FM, конфокальна мікроскопія
Повний текст: (PDF, англійською)

References

[1] Bryan NS, Bian K, Murad F. Discovery of the nitric oxide signaling pathway and targets for drug development. Front Biosci (Landmark Ed). 2009;14:1-18.
[2] Levine AB, Punihaole D, Levine TB. Characterization of the role of nitric oxide and its clinical applications. Cardiology. 2012;122(1):55-68.
[3] Danylovich IuV. [Nitric oxide as the regulator of intracellular homeostasis in the uterus myocytes]. Ukr Biokhim Zh (1999). 2012;84(3):5-25.
[4] L?pez-Figueroa MO, Caama?o C, Morano MI, R?nn LC, Akil H, Watson SJ. Direct evidence of nitric oxide presence within mitochondria. Biochem Biophys Res Commun. 2000;272(1):129-33.
[5] Giulivi C, Kato K, Cooper CE. Nitric oxide regulation of mitochondrial oxygen consumption I: cellular physiology. Am J Physiol Cell Physiol. 2006;291(6):C1225-31.
[6] Shiva S. Nitrite: A Physiological store of nitric oxide and modulator of mitochondrial function. Redox Biol. 2013;1(1):40-4.
[7] Nakatsubo N, Kojima H, Kikuchi K, Nagoshi H, Hirata Y, Maeda D, Imai Y, Irimura T, Nagano T. Direct evidence of nitric oxide production from bovine aortic endothelial cells using new fluorescence indicators: diaminofluoresceins. FEBS Lett. 1998;427(2):263-6.
[8] Mollard P, Mironneau J, Amedee T, Mironneau C. Electrophysiological characterization of single pregnant rat myometrial cells in short-term primary culture. Am J Physiol. 1986;250(1 Pt 1):C47-54.
[9] Danylovych IuV, Danylovych HV, Kolomiiets' OV, Kosterin SO, Karakhim SO, Chunikhin OIu. [Investigation of nitrosactive compounds influence on polarization of the mitochondrial inner membrane in the rat uterus myocytes using potential sensitive fluorescent probe DiOC6(3)]. Ukr Biochem J. 2014;86(1):42-55.
[10] Kucherenko ME, Babenuk YuD, Voytsitskyy VM. Modern methods of biochemical studies: tutorials. Kiyv, Fitosotsiotsentr. 2001: 424 p.
[11] Kojima H, Nakatsubo N, Kikuchi K, Kawahara S, Kirino Y, Nagoshi H, Hirata Y, Nagano T. Detection and imaging of nitric oxide with novel fluorescent indicators: diaminofluoresceins. Anal Chem. 1998;70(13):2446-53.
[12] Babich LG, Shlykov SG, Borisova LA, Kosterin SA. [Energy-dependent Ca2+-transport in intracellular smooth muscle structures]. Biokhimiia. 1994;59(8):1218-29.
[13] V?te?ek J, Lojek A, Valacchi G, Kubala L. Arginine-based inhibitors of nitric oxide synthase: therapeutic potential and challenges. Mediators Inflamm. 2012;2012:318087.
[14] Buckman JF, Hern?ndez H, Kress GJ, Votyakova TV, Pal S, Reynolds IJ. MitoTracker labeling in primary neuronal and astrocytic cultures: influence of mitochondrial membrane potential and oxidants. J Neurosci Methods. 2001;104(2):165-76.