Biopolym. Cell. 1987; 3(5):263-269.
Генно-інженерна біотехнологія
Вектори для клонування і визначення активності елементів транскрипційної системи бактерій. Клонування термінатора транскрипції оперону рРНК з архебактерій Halobacterium halobium
1Скрипкін Є. А., 1Манькін А. С., 1Копилов А. М., 2Худяков Ю. Є.
  1. Московський Державний Університет ім. М. В. Ломоносова
    Москва, СРСР
  2. Інститут вірусології ім. Д. І. Івановського АМН СРСР
    Москва, СРСР

Abstract

Сконструйовано рекомбінантні плазміди рММ24 і pVR41, які містять промоторний район PR бактеріофага λ з областями ініціації транскрипції і ініціації трансляції репресора ?сrо, полілінкер і ділянку термінації транскрипції бактеріофага fd. Показано, що в клітинах Е. coli синтезуються короткі гібридні мРНК, які кодуються міні-геном. Вбудовування в полілінкерну послідовність міні-гена інших структур, термінуючих транскрипцію (наприклад, передбачуваного термінатора транскрипції оперона рРНК H. halobium), призводить до утворення в клітинах Е. coli гібридних РНК відповідної довжини, експресію яких можна спостерігати при вирощуванні бактерій на середовищі з радіоактивним попередником.

References

[1] Zabeau M, Stanley KK. Enhanced expression of cro-beta-galactosidase fusion proteins under the control of the PR promoter of bacteriophage lambda. EMBO J. 1982;1(10):1217-24.
[2] Maniatis T., Fritsch E. F., Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual New York: Cold Spring Harbor Lab. publ., 1982 545 p.
[3] Mukhopadhyay M, Mandal NC. A simple procedure for large-scale preparation of pure plasmid DNA free from chromosomal DNA from bacteria. Anal Biochem. 1983;133(2):265-70.
[4] Maxam AM, Gilbert W. Sequencing end-labeled DNA with base-specific chemical cleavages. Methods Enzymol. 1980;65(1):499-560.
[5] Jinks-Robertson S, Gourse RL, Nomura M. Expression of rRNA and tRNA genes in Escherichia coli: evidence for feedback regulation by products of rRNA operons. Cell. 1983;33(3):865-76.
[6] von Gabain A, Belasco JG, Schottel JL, Chang AC, Cohen SN. Decay of mRNA in Escherichia coli: investigation of the fate of specific segments of transcripts. Proc Natl Acad Sci U S A. 1983;80(3):653-7.
[7] Ikemura T, Itoh S, Post LE, Nomura M. Isolation and characterization of stable hybrid mRNA molecules transcribed from ribosomal protein promoters in E. coli. Cell. 1979;18(3):895-903.
[8] Hui I, Dennis PP. Characterization of the ribosomal RNA gene clusters in Halobacterium cutirubrum. J Biol Chem. 1985;260(2):899-906.
[9] Daniels CJ, Hofman JD, MacWilliam JG, Doolittle WF, Woese CR, Luehrsen KR, Fox GE. Sequence of 5S ribosomal RNA gene regions and their products in the archaebacterium Halobacterium volcanii. Mol Gen Genet. 1985;198(2):270-4.
[10] Moritz A, Lankat-Buttgereit B, Gross HJ, Goebel W. Common structural features of the genes for two stable RNAs from Halobacterium halobium. Nucleic Acids Res. 1985;13(1):31-43.
[11] Mankin AS, Kagramanova VK. Complete nucleotide sequence of the single ribosomal RNA operon of Halobacterium halobium: secondary structure of the archaebacterial 23S rRNA. Mol Gen Genet. 1986; 202(1):152-161.
[12] Donis-Keller H, Maxam AM, Gilbert W. Mapping adenines, guanines, and pyrimidines in RNA. Nucleic Acids Res. 1977;4(8):2527-38.