Biopolym. Cell. 2013; 29(5):424-427.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.000834
Короткі повідомлення
Диференційне впізнавання білка ITSN2/Ese2 доменами SH2 білків Fyn, Abl1, PLCg1 і PI3KR1 у тканинах миші
1Новохацька О. В., 1Паньківський С. В., 1Дергай М. В., 1Циба Л. О., 1Риндич А. В.
  1. Державна ключова лабораторія молекулярної і клітинної біології
    Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
    вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680

Abstract

Нещодавно виявлено фосфорилювання адаптора ендоцитозу ITSN2, що забезпечує впізнавання цього білка SH2-доменами білків, залучених до передачі мітогенного сигналу. Метою цієї роботи було перевірити, чи має взаємодія ITSN2 з SH2-вмісними біл- ками тканиноспецифічний характер. Методи. Передбачення мотивів взаємодії in silico, експресія білків у бактерійній системі та культурі клітин ссавців, преципітація з використанням білків, злитих з GST. Результати. Дані фосфопротеомних досліджень свідчать про фосфорилювання тирозинових залишків гомолога ITSN2 миші, білка Ese2. За допомогою сервісу Scansite у складі Ese2 передбачено мотиви взаємодії з доменами SH2 білків Fyn, Abl1, PLCg1 і PI3KR1. Порівняння послідовностей інтерсектинів людини та миші показало консервативність передбачених мотивів. Отримано злиті з GST домени SH2 білків Fyn, Abl1, PLCg1 і PI3KR1, які використано для преципітації білка Ese2 з лізатів мозку, легень і серця миші. Зв’язування Ese2 з доменами SH2 білків Fyn і PLCg1 спостерігали в усіх досліджуваних тканинах, тоді як домени SH2 білків Abl1 і PI3KR1 упізнавали Ese2 лише в легенях та серці. Висновки. Диференційне впізнавання Ese2/SH2 у тканинах дозволяє припустити, що тканиноспецифічне фосфорилювання регулює специфічне зв’язування адапторного білка Ese2 із сигнальними молекулами.
Keywords: ITSN2/Ese2, фосфорилювання тирозинових залишків, домен SH2, тканиноспецифічні взаємодії
Повний текст: (PDF, англійською)

References

[1] Tsyba L., Nikolaienko O., Dergai O., Dergai M., Novokhatska O., Skrypkina I., Rynditch A. Intersectin multidomain adaptor proteins: regulation of functional diversity Gene 2011 473, N 2:67–75.
[2] Tsyba L. O., Dergai M. V., Skrypkina I. Ya., Nikolaienko O. V., Dergai O. V., Kropyvko S. V., Novokhatska O. V., Morderer D. Ye., Gryaznova T. A., Gubar O. S., Rynditch A. V. ITSN protein family: regulation of diversity, role in signalling and pathology Biopolym. Cell 2013 29, N 3:244–251.
[3] Novokhatska O., Dergai M., Tsyba L., Skrypkina I., Filonenko V., Moreau J., Rynditch A. Adaptor proteins Intersectin 1 and 2 bind similar proline-rich ligands but are differentially recognized by SH2 domain-containing proteins PLoS One 2013 8, N 7 e70546.
[4] Obenauer J. C., Cantley L. C., Yaffe M. B. Scansite 2.0: Proteome-wide prediction of cell signaling interactions using short sequence motifs Nucleic Acids Res 2003 31, N 13:3635– 3641.
[5] Hornbeck P. V., Kornhauser J. M., Tkachev S., Zhang B., Skrzypek E., Murray B., Latham V., Sullivan M. PhosphoSitePlus: a comprehensive resource for investigating the structure and function of experimentally determined post-translational modifications in man and mouse Nucleic Acids Res 2012 40, Database issue D261–270.
[6] Huttlin E. L., Jedrychowski M. P., Elias J. E., Goswami T., Rad R., Beausoleil S. A., Villen J., Haas W., Sowa M. E., Gygi S. P. A tissue-specific atlas of mouse protein phosphorylation and expression Cell 2010 143, N 7:1174–1189.
[7] McGavin M., Badour K., Hardy L. A., Kubiseski T. J., Zhang J., Siminovitch K. A. The intersectin 2 adaptor links Wiskott Aldrich syndrome protein (WASp)-mediated actin polymerization to T cell antigen receptor endocytosis J. Exp. Med 2003 194, N 12:1777–1787.
[8] Rodriguez-Fraticelli A. E., Vergarajauregui S., Eastburn D. J., Datta A., Alonso M. A., Mostov K., Martin-Belmonte F. The Cdc42 GEF Intersectin 2 controls mitotic spindle orientation to form the lumen during epithelial morphogenesis J. Cell Biol 2010 189, N 4:725–738.
[9] Novokhatska O., Dergai M., Houssin N., Tsyba L., Moreau J., Rynditch A. Intersectin 2 nucleotide exchange factor regulates Cdc42 activity during Xenopus early development Biochem. Biophys. Res. Commun 2011 408, N 4:663–668.
[10] Klein I. K., Predescu D. N., Sharma T., Knezevic I., Malik A. B., Predescu S. Intersectin-2L regulates caveola endocytosis secondary to Cdc42-mediated actin polymerization J. Biol. Chem 2009 284, N 38:25953–25961.