Biopolym. Cell. 2012; 28(2):134-140.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.000040
Молекулярна та клітинна біотехнології
Вплив бустерної імунізації фрагментом Е2 ВКЧС на імунну відповідь, індуковану маркованою ДНК-вакциною проти КЧС
1Похоленко Я. О., 1Гулько Т. П., 2Дерябина О. Г., 1Кордюм В. А.
  1. Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
    Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680
  2. Інститут ветеринарної медицини НААН України
    Вул. Донецька, 30, Київ, Україна, 03151

Abstract

Мета. Дослідити вплив бустерної імунізації рекомбінантним фрагметом Е2 ВКЧС на гуморальну імунну відповідь, індуковану кандидатною маркованою ДНК-вакциною проти КЧС. Методи. Наявність фрагмента гена Е2 ВКЧС детектували методом ПЛР, а експресію білка – продукту цього гена – імуногістохімічним методом. Титр антитіл, специфічних до цільового антигену, у сироватці крові після імунізації визначали, використовуючи ІФА. Результати. Продемонстровано, що кандидатна маркована ДНКвакцина in situ трансфікує міоцити біцепса. На основі даних імуногістохімічного аналізу встановлено, що з введеної плазмідної конструкції здійснюється експресія фрагмента Е2 ВКЧС. Бустерна імунізація рекомбінантним Е2 ВКЧС після двох імунізацій маркованою ДНК-вакциною спричиняє зростання титру антитіл до цільового антигену у порівнянні з триразовою імунізацією ДНК-вакциною. Висновки. Результати проведених досліджень свідчать про те, що використання бустерної імунізації рекомбінантним фрагментом Е2 сприяє посиленню гуморальної імунної відповіді на кандидатну марковану ДНК-вакцину проти КЧС.
Keywords: маркована ДНК-вакцина, бустерна імунізація, гуморальна імунна відповідь, вірус класичної чуми свиней
Повний текст: (PDF, російською) (PDF, англійською)

References

[1] Beer M., Reinmann I., Hoffman B., Depner K. Novel marker vaccines against classical swine fever. Vaccine 2007 25, N 30:5665–5670.
[2] Vasilyev D. A., Lugovtcev V. Iu. The course of lectures in virology. Viruses causing diseases of swine Ulyanovsk: USAA, 2004 Part 3 85 p.
[3] Tarradas J., Alvarez B., Fraile L., Rosell R., Munoz M., Galindo-Cardiel I., Domingo M., Dominguez J., Ezquerra A., Sobrino F., Ganges L. Immunomodulatory effect of swine CCL20 chemokine in DNA vaccination against CSFV. Vet. Immunol. Immunopathol 2011 142, N 3–4:243–251.
[4] Wienhold D., Armengol E., Maroquardt A., Maroquardt C., Voigt H., Buttner M., Saalmuller A., Pfaff E. Immunomodulatory effect of plasmids co-expressing cytokines in classical swine fever virus subunit gp55/E2-DNA vaccination. Vet. Res 2005 36, N 4:571–587.
[5] Ganges L., Barrera M., Nunez J. I., Blanco I., Frias M. T., Rodriges F., Sobrino F. A DNA vaccine expressing the E2 protein of classical swine fever virus elicits T cell responses that can prime for rapid antibody production and confer total protection upon viral challenge. Vaccine 2005 23, N 28:3741–3752.
[6] Makowska-Daniel I., Collins R. A., Pejsak Z. Evaluation of genetic vaccine against classical swine fever. Vaccine 2001 19, N 17–19:2480–2484.
[7] Yu X., Tu C., Li H., Hu R., Chen C., Li Z., Zhang M., Yin Z. DNA mediated protection against classical swine fever virus. Vaccine 2001 19, N 11–12:1520–1525.
[8] Pokholenko I. A., Ruban T. O., Sukhorada O. M., Deriabin O. M., Tytok T. G., Kordium V. A. The development of DNA-vaccine against classical swine fever. Biopolym. Cell 2007 23, N 2:93–99.
[9] Schneeweiss A., Chabiersli S., Salomo M., Delaroque N., Al-Robaiy S., Grunwald T., Burki K., Liebert U. G., Ulbert S. A DNA vaccine encoding the E protein of West Nile virus is protective and can be boosted by recombinant domain DIII. Vaccine 2011 29, N 37:6352–6357.
[10] Zhao H. P., Sun J. F., Li N., Sun Y., Wang Y., Qui H. J. Prime-boost immunization using alphavirus replicon and adenovirus vectored vaccines induces enhanced immune responses against classical swine fever virus in mice. Vet. Immunol. Immunopathol 2009 131, N 3–4:158–166.
[11] Hammond J. M., Jansen E. S., Morrissy C. J., Goff W. V., Meehan G. C., Williamson M. M., Lenghaus C., Sproat K. W., Andrew M. E., Coupar B. E., Johnson M. A. A prime-boost vaccination strategy using naked DNA followed by recombinant porcine adenovirus protects pigs from classical swine fever. Vet. Microbiol 2001 80, N 2:101–119.
[12] Sambrook J., Fritsch E. E., Maniatis T. Molecular cloning Cold Spring Harbor Lab. press, 1989 625 p.
[13] Yamamoto T., Horikoshi M. Rapid preparation of plasmid templates suitable for a DNA sequences without RNAse treatment. Nucleic Acids Res 1995 23, N 16:3351–3352.
[14] Current protocols in molecular biology / Eds F. M. Ausubel et al New York: John Wiley & Sons, Inc., 1997 Vol. 1:1.7.9–1.7.10.
[15] DNA vaccines: methods and protocols / Eds D. B. Lawrie, R. G. Whalen New York: Humana press, 2000 529 p.
[16] Deryabin O., Kulinich R., Deryabina O., Reznik V. Protective properties of the Classical Swine fever virus E2 recombinant protein expressed in E. coli. Herald of Bila Tserkva National Agrarian University 2005 31:151–158.
[17] Dupuis M., Denis-Mize K., Woo C., Goldbeck C., Selby M. J., Chen M., Otten G. R., Ulmer J. B., Donnelly J. J., Ott G., McDonald D. M. Distribution of DNA vaccines determines their immunogenicity after intramuscular injection in mice. J. Immunol 2000 165, N 5:2850–2858.