Biopolym. Cell. 2009; 25(6):484-490.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.0007FB
Біоорганічна хімія
Новосинтезовані карбоцiанінові флуоресцентні зонди, їхня характеристика та поведінка в проліферуючих культурах
1Гончарук О. І., 2Боровой І. А., 1Павлович О. В., 2Малюкін Ю. В., 1Грищенко В. І.
  1. Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
    23, Переяслівська вул., Харків, Україна, 61015
  2. Державна наукова установа «Інститут монокристалів» НАН України
    Леніна просп., 60, Харків, Україна, 61001

Abstract

Mета. Дослідити можливості застосування карбоціанінових флуоресцентних зондів С2, С9, С18 та JC-1 для характеристики культур клітин. Методи. Використано морфологічні методи, метод проточної цитофлуориметрії (FACS-аналіз), люмінесцентну мікроскопію. Результати. Показано, що досліджені карбоціанінові зонди зберігаються в клітинах, що діляться, протягом не менш чотирьох подвоєнь. Встановлено, що карбоціаніновий зонд JC-1 не переходить із клітини в клітину при одночасному культивуванні мічених і немічених клітин різних культур. Висновки. Встановлено, що зазначені флуоресцентні зонди можна використовувати при довготривалому культивуванні клітинних ліній. Для спостереження за проліферуючими культурами оптимальним є застосування зондів С9 і JC-1, що дозволяє відслідковувати функціональний стан мітохондрій.
Keywords: флуоресценція, зонди, фібробласти людини, культура клітин
Повний текст: (PDF, англійською)

References

[1] Downing T. W., Garner D. L., Ericsson S. A., Redelman D. Metabolic toxicity of fluorescent stains on thawed cryopreserved bovine sperm cells J. Histochem. and Cytochem 1991 39, N 4:485–489.
[2] Ferrari A., Hannouche D., Oudina K., Bourguignon M. In vivo tracking of bone marrow fibroblasts with fluorescent carbocyanine dye J. Biomed. Mat. Res 2001 56, N 3 P. 361–367.
[3] Goncharuk E. I., Onischenko E. V., Timon V. V., Petrenko T. F., Borovoy I. A., Maliukin Yu. V., Grishchenko V. I. Application of carbocyanine fluorescent probes for evaluation of the functional state of cell cultures after cryoconservation Biopolym. Cell 2008 24, N 3:225–230.
[4] Culture of living cells. Methods. Ed. R. Freshney M.: Mir, 1989 333 p.
[5] Adams R. L. P. Cell culture for biochemists Amsterdam: Elsevier, 1980 292 p.
[6] Smiley S. T., Reers M., Mottola-Hartshorn C., Lin M., Chen A., Smith T. W., Steele G. D., Chen L. B. Intracellular heterogeneity in mitochondrial membrane potentials revealed by a J-aggregate-forming lipophilic cation JC-1 Proc. Nat. Acad. Sci. USA 1991 88, N 9:3671–3675.
[7] Rossi U. De, Moll J., Spieles M., Bach G., Dahne S., Kriwanek J., Lisk M. Control of the J-aggregation by variation of the N-alkyl-substituents J. Prakt. Chem 1995 337:203–208.
[8] Kiprianov A. I., Pilyugin G. P. Synthesis of polymethine dyes. Scientific notes of Kharkiv University. 1937; 10:91–107.
[9] Johnson L. V., Walsh M. L., Bockus B. J., Chen L. B. Monitoring of relative mitochondrial membrane potential in living cells by fluorescence microscopy Annu. Rev. Cell Biol 1988 4:155–181.
[10] Salvioli S., Ardizzoni A., Franceschi C., Cossarizza A. JC-1, but not DiOC6(3) or rhodamine 123, is a reliable fluorescent probe to assess DY changes in intact cells: implications for studies on mitochondrial functionality during apoptosis FEBS Lett 1997 411:77–82.
[11] Petrov N. Kh., Gulakov M. N., Alfimov M. V., Busse G., Techert S. Solvation-shell effect on the cyanine-dye fluorescence in binary liquid mixtures Z. Physik. Chem 2007 221. N 4:537–547.
[12] Tatikolov A. S., Shvedova L. A., Derevyanko N. A., Ishchenko A. A., Kuzmin V. A The influence of counterion on photochemistry of cationic indopolycarbocyanine dyes in ions pairs. Chem Phys Lett. 1992; 190(3–4):291–297.
[13] Malyukin Yu. V., Borovoy I. A., Kavok N. S. Accumulation of oxocarbocyanines with different length of alkyl chains in cells of bone marrow and hepatocytes Biophyzica 2007 52, N 4:667–673.
[14] Terasaki M. Fluorescent labeling of endoplasmic reticulum Meth. Cell Biol San Diego: Acad. press, 1989 Vol. 29 P. 125–135.
[15] Terasaki M., Chen L. B., Fujiwara K. Microtubules and the endoplasmic reticulum are highly interdependent structures J. Cell Biol 1986 103:1557–1568.
[16] Terasaki M., Celis J. Labeling of endoplasmic reticulum with DiOC6(3) in cell biology: A laboratory handbook Orlando: Acad. press, 1994 Vol. 2:381–386.
[17] Kruyt M. C., De Bruijn J., Veenhof M., Oner F. C., Van Blitterswijk C. A., Verbout A. J., Dhert W. J. Application and limitations of chloromethyl-benzamidodialkylcarbocyanine for tracing cells used in bone tissue engineering Tissue Engin 2003 9, N 1:105–115.