Biopolym. Cell. 2006; 22(2):117-120.
Структура та функції біополімерів
Одержання рекомбінантного шаперону GroEL і його имунологічна крос-реактивність з Hsp60
1Капустян Л. М., 1Кіямова Р. Г., 1Гришкова В. С., 1Терентьєв А. Г., 1Філоненко В. В., 1Сидорик Л. Л.
  1. Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
    Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680
Описано метод одержання і очищення рекомбінантного шапе­рону GroEL (прокаріотного гомолога еукаріотного шаперону Hsp60), що включає експресію білка в клітинах Escherichia coli з наступним градієнтним висолюванням з лізату клітин-продуцентів, гель-фільтрацією на сефакрилі-SZQO та іонообмін­ною хроматографією на MonoQ HR 5/5. Такий метод дозво­лив ефективно напрацювати білок GroEL у препаративних кількостях, який потім використовували для отримання анmu-GroEL антитіл і синтезу афінної колонки. Показано імуно­ логічний перехрест афінно очищених поліклональних анти-GroEL антитіл з білком родини Hsp60 у лізатах органів і клітин різних видів ссавців — від миші до людини, що дозволяє використовувати ці антитіла при вивченні змін рівня експ­ресії і клітинної локалізації Hsp60 в разі аутоімунних і ракових патологій людини.
Keywords: GroEL, Hsp60, іонообмінна хроматографія, гель-фильтрація, поліклональні антитіла, аутоімунні патології людини