Biopolym. Cell. 2005; 21(4):319-325.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.0006F8
Клітинна біологія
Вивчення вуглеводної специфічності гемолітичного лектину блідої поганки (Amanita phalloides (Vaill. Fr.) Secr)
1Антонюк В. О.
  1. Інститут біології клітини НАН України
    вул. Драгоманова, 14/16, Львів, Україна, 79005

Abstract

Описано очищення та деякі фізико-хімічні властивості гемолітичного лектину фалолізину А. phalloides (Vaill. Fr.) Secr. Згідно з даними електрофорезу в поліакриламідному гелі у присутності DS-Na, фалолізин складається з поліпептидів молекулярною масою (м. м.) близько 18 кДа. М. м. цього лектину, визначена гель-фільтрацією на Toyopearl HW-55, склала 35 кДа. Фалолізин є термолабільним, прогрівання протягом 30 хв при температурі 65 °С повністю позбавляє його гемолітичних і гемаглютинуючих властивостей. Ці активності не залежать від присутності іонів кальцію. Чутливість еритроцитів різних видів до гемолітичної дії фалолізину зменшується в ряду: кріль > щур > людина Експерименти з осмотичного захисту виконано на еритроцитах кроля. При інкубації еритроцитів з фалолізином у присутності поліетиленгліколю (ПЕГ) різної м. м. швидкість лізису пригнічувалася в міру збільшення розміру молекули ПЕГ. Одержані результати свідчать про те, що фалолізин у мембранах еритроцитів формує іоно-проникні пори, функціональний діаметр яких є меншим за 2,3 нм (але більшим від 1,6 нм). У той же час присутність ПЕГ не впливає на його гемаглютинуючу активність, що дозволяє вивчати вуглеводну специфічність цього лектину блідої поганки. Вивчення вуглеводної специфічності фалолізину виявило, що він найкраще взаємодіє з D-галактозою і її β-похідними. Встановлено, що фалолізин не надає явної переваги при взаємодії з глікопротеїнами О-гліканного типу над такими N-гліканного типу.
Keywords: Amanita phalloides, фалолізин, гемоліз, осмотичний захист, вуглеводна спе­цифічність
Повний текст: (PDF, українською)

References

[1] Vasser SP. Flora mushrooms Ukraine. Amanita mushrooms. Kiev: Naukova Dumka, 1992; 168 p.
[2] Seeger R. Demonstration and isolation of phallolysin, a haemolytic toxin from Amanita phalloides. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 1975;287(3):277-87.
[3] Lutsik-Kordovsky MD, Antonyuk VA, Stasyk TV, Yakymovych MYa, Yakymovych LA, Hellman U, Soushelriytsky S, Stoika RS, Lutsik AD. Hemagglutinating lectin from fruit bodies of Amanita phalloides: isolation, properties and, biological activity: Abstr. Portsmouth: Univ. press. 1999: 77.
[4] Lutsik-Kordovsky MD, Stasyk TV, Stoika RS. Analysis of cytotoxicity of lectins and non-lectin proteins from Amanita mushrooms. Exp Onkol. 2001; 23(1): 43-5.
[5] Hatakeyama T, Kohzaki H, Nagatomo H, Yamasaki N. Purification and characterization of four Ca(2+)-dependent lectins from the marine invertebrate, Cucumaria echinata. J Biochem. 1994;116(1):209-14.
[6] Roch P, Canicatti C, Valembois P. Interactions between earthworm hemolysins and sheep red blood cell membranes. Biochim Biophys Acta. 1989;983(2):193-8.
[7] Tateno H, Goldstein IJ. Molecular cloning, expression, and characterization of novel hemolytic lectins from the mushroom Laetiporus sulphureus, which show homology to bacterial toxins. J Biol Chem. 2003;278(42):40455-63.
[8] Kouriki-Nagatomo H, Hatakeyama T, Jelokhani-Niaraki M, Kondo M, Ehara T, Yamasaki N. Molecular mechanism for pore-formation in lipid membranes by the hemolytic lectin CEL-III from marine invertebrate Cucumaria echinata. Biosci Biotechnol Biochem. 1999;63(7):1279-84.
[9] As. SSSR 1554961. A method of producing an affinity sorbent for lectins purification. VA Antonyuk. BI. 13.
[10] Maurer H. Disc electrophoresis and related techniques of polyacrylamide gel electrophoresis. de Gruyter. Berlin–New York. 1971. 222 p.
[11] Kabat EA, Mayer MM. Experimental Immunochemistry. Illinois: Charles Thomas Publ., 1964. 690 p.
[12] Lazur'evskiy GV, Terent'eva IV, Shamchurin AA. Practical work on Natural Compounds Chemistry. M.: Vyshchaya Shkola. 1966; 336 p.
[13] Methods of carbohydrate chemistry. Ed. NK Kochetkov. M. Mir, 1967. 512 p.
[14] Lutsik AD, Detyuk AS, Lutsik MD. Lectin in histochemistry. Lviv: Lviv Univ. publ., 1989 144 p.
[15] Scherrer R, Gerhardt P. Molecular sieving by the Bacillus megaterium cell wall and protoplast. J Bacteriol. 1971;107(3):718-35.
[16] Nagahama M, Hayashi S, Morimitsu S, Sakurai J. Biological activities and pore formation of Clostridium perfringens beta toxin in HL 60 cells. J Biol Chem. 2003;278(38):36934-41.