Biopolym. Cell. 2004; 20(6):493-497.
Структура та функції біополімерів
Очищення та властивості лектинів з надземної частини рослин
трьох видів роду нечуй-вітер (Hieracium)
- Інститут біології клітини НАН України
вул. Драгоманова, 14/16, Львів, Україна, 79005
Abstract
З надземної частини рослин трьох видів роду нечуй-вітер
(Hieracium aurantiacum, Н. pilosellа, H. sylvularum), які належать до родини Asteraceae, очищено лектини з виходом 61, 126 і 92 мі на 1 кг сирої маси сировини відповідно. Молекулярна
маса усіх трьох лектинів, визначена гельхроматографією на Toyopearl HW-55, складає 36 к Да. При електрофорезі в ПААГ
у присутності ДС-Na виявлено одну зону з молекулярною
масою приблизно 18 к Да. Очевидно, лектини нечуй-вітрів складаються з двох ідентичних субодиниць. При диск-електрофорезі в лужному (рН 8,9) і кислому (рН 4,3) середовищах виявлено по одній зоні. У складі молекул лектинів знайдено 2,1–2,2 % вуглеводів. Лектини рослин трьох видів роду
нечуй-вітер найкраще аглютинують еритроцити кроля, слабше – еритроцити курки, барана і людини. Кращим інгібітором активності усіх трьох лектинів є N,N'N"',N"'-тетраацетилхітотетраоза, яка у 8 разів є сильніший інгібітор,
ніж N ,N' -діацетилхітобіоза, та в 625 разів — ніж N-ацетилD-глюкозамін. Для гістохімічних досліджень отримано
кон'югати лектинів з пероксидазою хрону і лектини, мічені ФІТЦ.
Повний текст: (PDF, російською)
References
[2]
Lakhtin VM, Yamskov IA. Lectins in the investigation of receptors. Russ Chem Rev. 1991; 60 (8):903-23.
[3]
Roth J, Zuber C, Komminoth P, Sata T, Li WP, Heitz PU. Applications of immunogold and lectin-gold labeling in tumor research and diagnosis. Histochem Cell Biol. 1996;106(1):131-48.
[4]
Gornik I, Maravic G, Dumic J, Flogel M, Lauc G. Fucosylation of IgG heavy chains is increased in rheumatoid arthritis. Clin Biochem. 1999;32(8):605-8.
[5]
Lutsik MD, Antonyuk VA. Preparation of anti-A reagent of pea lectin shaggy to detect antigen A in erythrocytes and human saliva. Sud.med. ekspertiza.1995; 1:17-9.
[6]
Lutsik AD, Detyuk YeS, Lutsik MD. Lectin histochemistry. Lviv, Izd. L'viv Univ, 1989. 144 p.
[7]
Determinant of higher plants Ukraine. Ed. N Prokudin. Kyiv: Naukova Dumka, 1987; 389 p.
[8]
Bourne Y, Zamboni V, Barre A, Peumans WJ, Van Damme EJ, Rouge P. Helianthus tuberosus lectin reveals a widespread scaffold for mannose-binding lectins. Structure. 1999;7(12):1473-82.
[9]
Antonyuk VO, Rybak OV. Study of lectin-carbohydrate spetsyfychnosti ground of Echinacea purpurea and rudbeckia rozdilnolystoyi. Farmakom. 2002; 3:153-8.
[10]
Antonyuk VO, Dubyts'kyy OL. Study of carbohydrate specificity of lectins from plants of the genus Artemisia. Ukr Biokhim Zh. 2002;74(4B Suppl 2):114.
[11]
A. p. USSR number 1554961. A method for producing affinity sorbent for purification of lectins. VA Antonyuk. Byul. izobreteniy. 1990. N 13.
[12]
Read SM, Northcote DH. Minimization of variation in the response to different proteins of the Coomassie blue G dye-binding assay for protein. Anal Biochem. 1981;116(1):53-64.
[13]
Lutsik MD, Panasyuk EH, Antonyuk VA, Lutsik AD, Ladnaya LYa. Research methods carbohydrate specificity of lectins (Method. recommendations). Lviv, 1983. 22 p.
[14]
Maurer HR. Disc electrophoresis and related techniques of polyacrylamide gel electrophoresis. de Gruyter, 1971; 222 p.
[15]
Kato Y., Komiya K., Iwaed T., Sasaki H., Hashimoto T. Packing of toyopearl column for gel filtration. I. Influence of packing velocity on column performance. J Chromatogr A. 1981; 205 (1):185-188.
[16]
Dubois M., Gilles K.A., Hamilton J.K., Rebers P.A., Smith F. Colorimetric method for determination of sugars and related substances. Anal Chem. 1956;28 (3): 350-356.
[17]
Nakane PK, Kawaoi A. Peroxidase-labeled antibody. A new method of conjugation. J Histochem Cytochem. 1974;22(12):1084-91.
[18]
Antoniuk VA, Iashchenko AM. Conjugation of lectins with horseradish peroxidase: an improved method. Klin Lab Diagn. 1996;(3):51-2.
