Biopolym. Cell. 2000; 16(6):540-546.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.000595
Молекулярні механізми диференціювання
Транспорт іонів натрію на ранніх етапах диференціювання клітин нейробластоми людини, індукованої рекомбінантним інтерфероном-альфа 2b (лафероном)
1Рожманова О. М., 1Долга О. В., 1Стельмах Л. М., 1Погорела Н. Х., 1Кучер В. В., 1Міранський А. В., 1Магура І. С., 2Мацука Г. Х.
  1. Інститут фізіології ім. О. О. Богомольця НАН України
    Вул. Академіка Богомольця, 4, Київ, Україна, 01024
  2. Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
    Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680

Abstract

Досліджували вплив рекомбінантного інтеррону (IФН)-альфа 2b (лаферону) на транспорт іонів Na+ в клітинах нейробластоми людини лінії IMR 32. Показано, що ІФН-альфа 2b (600 МЕ/мл) наприкінці першої доби дії гальмував проліферацію та викликав морфологічне диференціювання принаймні 50 % культивованих клітин. Перехід клітин у диференційований стан супроводжувався зміною потоків іонів нат­рію через плазматичну мембрану. перші хвилини після дії ІФН-альфа 2b вхідний потік іонів Na в недиференційованих клітинах зменшувався на 20 % порівняно з контролем. У цих клітинах деполяризація плазматичної мембрани, обумовлена внесенням вератрину (200 мкг/мл) та токсину скорпіна Leiurus quinquestriatus (200 мкг/мл), призводила до збільшення вхідного потоку іонів Na+ на 50 %. У диференційованих клітифрх при деполяризації їх нейротоксинами вхідний потік іонів Na+ був у 3,2 разу більшим, ніж у недиференційованих. Тетродотоксин (ТТХ) у концентрації 4·10–7 М повністю блокував вхідний потік у недиференційованих клітинах. У диференційованих клітинах вказаний потік під впливом ТТХ зменшувався на 50 %. Це є свідченням того, що в процесі диференціювання, індукованого ІФН-альфа 2b, у плазматичних мембранах клітин IMR 32 з'являються потенціалзалежні нечутливі до ТТХ натрієві канали. Активність Na+ , К+ -АТРази в перші хвилини дії IФН-альфи 2b зменшувалася у 2 разу порівняно з контролем. Протягом першої доби від почат­ку дії ІФН-альфа 2b активність ферменту відновлювалася і складала 80 % від контрольного рівня. Отримані in vitro дані дають можливість наблизитися до розуміння механізмів нейроімунної взаємодії та оцінки антипроліферативної дії лаферону in vivo.
Повний текст: (PDF, російською)

References

[1] Rossi Govanni B. Interferon and cell differentiation. Interferon. 1985; 6:31-68.
[2] Vyatchenko-Karpinskii SV, Pogorelaya NK, Magura IS, Rozhmanova OM, Kvasyuk VI, Mikhailopulo IA. a2-Interferon- and oligoadenylate-induced morphological differentiation and modulation of the ion channels in neuroblastoma cells. Neurophysiology. 1996;27(3):156–63.
[3] Kuralay F, Tanyal?in T, Kutay F, Ers?z G, Y?ce G, Batur Y. The effect of interferon therapy on erythrocyte membrane Na+,K+ ATP activity in patients with chronic hepatitis B and C virus infections. Biochem Mol Biol Int. 1998;45(6):1189-98.
[4] Yokoyama M, Koike K, Kanno S-I, Ohtsuki K. Biochemical characterization of the membrane-associated phosphorylating proteins involved in the anti-proliferative effect of human recombinant interferon-alpha 2a (rIFN-alpha 2a) in Daudi cells. Tohoku J Exp Med. 1990; 160(4): 343-59.
[5] Kucher VV, Magura IS, Rozhmanova OM, Dolgaya EV, Pogorelaya IH. The action of recombinant interferon alfa-2b (Laferon) on the potential controlled sodium conductivity cell IMR 32. The role of neurotransmitters and regulatory peptides in life processes. Minsk: 1999:306-7.
[6] Lowry OH, Rosebrough NJ, Farr AL, Randall RJ. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J Biol Chem. 1951;193(1):265-75.
[7] Catterall WA. Activation of the action potential Na+ ionophore of cultured neuroblastoma cells by veratridine and batrachotoxin. J Biol Chem. 1975;250(11):4053-9.
[8] Fiske CH, Subbarow Y. The colorimetric determination of phosphorus. J Biol Chem. 1925; 66: 375-400.
[9] Nagao S, Tohgo A, Kohno M, Ogawa H. Cytostatic action of human fibroblast interferon in direct growth inhibition: effect on human malignant melanoma. Gan. 1983;74(3):452-8.
[10] Hannigan GE, Fish EN, Williams BR. Modulation of human interferon-alpha receptor expression by human interferon-gamma. J Biol Chem. 1984;259(13):8084-6.
[11] Sorrentino G, Monsurr? MR, Singh IN, Kanfer JN. Membrane depolarization in LA-N-1 cells. The effect of maitotoxin is Ca(2+)- and Na(+)-dependent. Mol Chem Neuropathol. 1997;30(3):199-211.
[12] Toselli M, Tosetti P, Taglietti V. Functional changes in sodium conductances in the human neuroblastoma cell line SH-SY5Y during in vitro differentiation. J Neurophysiol. 1996;76(6):3920-7.
[13] Vereninov AA, Marakhova II. Transport of ions in the cells in culture. L.: Nauka, 1986:292.