Biopolym. Cell. 1997; 13(5):408-415.
Генно-інженерна біотехнологія
Створення системи для ретровірусного переносу генів за допомогою векторного вірусу на базі Pr-RSV-C з розширеною хазяйською специфічністю
1Кайда І. В., 1Циба Л. О., 1Болтовець П. Н., 1Кашуба В. І.
  1. Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
    Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680

Abstract

Провірус адаптованого до качок варіанту вірусу Pr-RSV-C та його трансформаційно-дефектного мутанту став основою для створення реплікативно-компетентного вектора td da Pr-RSV-C е та. вірусу-помічника td da Pr-RSV-C е PS Neo, необхідного для упаковки реплікати&но-дефектного ретро­вірусного вектора. Для того щоб знизити вірогідність вклю­чення клітинних протоопко генів до складу ретровірусного вектора, послідовності Е-елементу, які можуть бути залучені до цього процесу, делетовано. Було показано, що QTb-клітини, трансформовані послідовностями вірусу-помічника td da PrRSV-C е PS Neo, продукують вірусні білки, зокрема p27gag, у кількості, необхідній для складання реплікативно-дефектного ретровірусного вектора. Геном вірусу-помічника модифіковано таким чином, що його власна РНК не включається до складу віріону та не відбувається складання повноцінної інфекційної частинки. Цей факт підтверджено тестуванням супернатантів пакуючих клонів методом зворотної транскрипції: більшість з них не показала включення HTTP у реакції зворотної транскрипції, характерного для регигікативно-ком­петентного вірусу,

References

[1] Zoubak S, Rynditch A, Bernardi G. Compositional bimodality and evolution of retroviral genomes. Gene. 1992;119(2):207-13. Review.
[2] Shimada T. Targeted gene transfer into CD4 positive cells by HIV based vectors. Int Symp on Human Gene Therapy (Sept. 10-13, 1995). Inuyama and Nagoya, 1995: 29.
[3] Boerkoel CF, Federspiel MJ, Salter DW, Payne W, Crittenden LB, Kung HJ, Hughes SH. A new defective retroviral vector system based on the Bryan strain of Rous sarcoma virus. Virology. 1993;195(2):669-79.
[4] Miller AD. Retrovirus packaging cells. Hum Gene Ther. 1990 Spring;1(1):5-14.
[5] Kaida IV, Rynditch AV. Usage of retrovirus vectors for gene transfer into birds. Biopolym Cell. 1997; 13(1):5-13.
[6] Kashuba VI, Zubak SV, Lazurkevich ZV, Ryndich AV, Kavsan VM. Structure of a new transformation-defective mutant of Rous sarcoma virus. Dokl Akad Nauk SSSR. 1989;304(1):206-8.
[7] Bova-Hill C, Olsen JC, Swanstrom R. Genetic analysis of the Rous sarcoma virus subgroup D env gene: mammal tropism correlates with temperature sensitivity of gp85. J Virol. 1991;65(4):2073-80.
[8] Kashuba VI, Kavsan VM, Ryndich AV, Lazurkevich ZV, Zubak SV, Popov SV, Dostalova V, Glozhanek I. Complete nucleotide sequence of Rous sarcoma virus variants adapted to duck cells. Mol Biol (Mosk). 1993;27(2):436-50.
[9] Bodor J, Svoboda J. The LTR, v-src, LTR provirus generated in the mammalian genome by src mRNA reverse transcription and integration. J Virol. 1989;63(2):1015-8.
[10] Barsov EV, Hughes SH. Gene transfer into mammalian cells by a Rous sarcoma virus-based retroviral vector with the host range of the amphotropic murine leukemia virus. J Virol. 1996;70(6):3922-9.
[11] Federspiel MJ, Bates P, Young JA, Varmus HE, Hughes SH. A system for tissue-specific gene targeting: transgenic mice susceptible to subgroup A avian leukosis virus-based retroviral vectors. Proc Natl Acad Sci U S A. 1994;91(23):11241-5.
[12] Dezelee P, Barnier JV, Briest'ansk? J, Geryk J, Karakoz I, Michailik AA, Nehyba J, Yatsula BA, Rynditch AV, Calothy G, et al. New case of c-src gene transduction: the generation of virus PR2257. Folia Biol (Praha). 1994;40(5):211-23.
[13] The molecular biology of RNA tumor virus. Eds R. Weiss et al. Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 1985: 580-585.
[14] Southern PJ, Berg P. Transformation of mammalian cells to antibiotic resistance with a bacterial gene under control of the SV40 early region promoter. J Mol Appl Genet. 1982;1(4):327-41.
[15] Moscovici C, Moscovici MG, Jimenez H, Lai MM, Hayman MJ, Vogt PK. Continuous tissue culture cell lines derived from chemically induced tumors of Japanese quail. Cell. 1977;11(1):95-103.
[16] Pogrebno? PV, Serov SM, Klenchin VA, Luk'ianov AV, Garmanchuk LV, Tarnavski? DV, Markeeva NV, Bykorez AI. Expression of the gene for transforming growth factor type alpha, transferred into A431 cells by a recombinant retroviral vector. Mol Biol (Mosk). 1993;27(4):833-8.
[17] Clark DP, Dougherty RM. Detection of avian oncovirus group-specific antigens by the enzyme-linked immunosorbent assay. J Gen Virol. 1980;47(2):283-91.
[18] Monoclonal antibodies: principles and practice. Ed. J. W. Coding. New York: Acad, press, 1986: 121-125.
[19] Kashuba VI, Zubak SV, Rynditch AV, Kavsan VM, Hlozanek I, Svoboda J. The nucleotide sequence of the region of src gene deletion in transformation-defective Rous sarcoma virus adapted to semi-permissive host cells. Nucleic Acids Res. 1989;17(8):3294.
[20] Emerman M, Temin HM. Genes with promoters in retrovirus vectors can be independently suppressed by an epigenetic mechanism. Cell. 1984;39(3 Pt 2):449-67.
[21] Emerman M, Temin HM. Quantitative analysis of gene suppression in integrated retrovirus vectors. Mol Cell Biol. 1986;6(3):792-800.
[22] Katz RA, Terry RW, Skalka AM. A conserved cis-acting sequence in the 5' leader of avian sarcoma virus RNA is required for packaging. J Virol. 1986;59(1):163-7.
[23] Savatier P, Bagnis C, Thoraval P, Poncet D, Belakebi M, Mallet F, Legras C, Cosset FL, Thomas JL, Chebloune Y, et al. Generation of a helper cell line for packaging avian leukosis virus-based vectors. J Virol. 1989;63(2):513-22.
[24] Dougherty JP, Temin HM. A promoterless retroviral vector indicates that there are sequences in U3 required for 3' RNA processing. Proc Natl Acad Sci U S A. 1987;84(5):1197-201.
[25] Cosset FL, Ronfort C, Molina RM, Flamant F, Drynda A, Benchaibi M, Valsesia S, Nigon VM, Verdier G. Packaging cells for avian leukosis virus-based vectors with various host ranges. J Virol. 1992;66(9):5671-6.
[26] Boris-Lawrie KA, Temin HM. Recent advances in retrovirus vector technology. Curr Opin Genet Dev. 1993;3(1):102-9.
[27] Cosset FL, Legras C, Chebloune Y, Savatier P, Thoraval P, Thomas JL, Samarut J, Nigon VM, Verdier G. A new avian leukosis virus-based packaging cell line that uses two separate transcomplementing helper genomes. J Virol. 1990;64(3):1070-8.