Biopolym. Cell. 1985; 1(2):99-105.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.00001A
Генно-інженерна біотехнологія
Експресія двох варіантів гена кор-антигену вірусу гепатиту В людини у Escherichia coli
1Борисова Г. П., 1Каліс Я. В., 1Дишлер А. В., 1Пумпен П. П., 1Грен Е. Я., 2Цибіногін В. В., 2Кукайі Р. А.
  1. Інститут органічного синтезу АН Латвійської РСР
    Рига, СРСР
  2. Інститут мікробіології АН Латвійської РСР
    Рига, СРСР

Abstract

Сконструйовано плазміди для прямої експресії в клітинах Escherichia coli двох варіантів гена кор-антигену вірусу гепатиту В людини, які відрізняються структурою 5-кінцевої частини, під контролем промотору триптофанового оперона. Послідовність Шайна-Далгарно гена trpL у цих плазмідах зближена з ініціювальними кодонами АТG –або першим, або другим – у відкритій фазі трансляції С, що відповідає гену кор-антигену. У спряженій безклітинній системі біосинтезу білка показано ефективний синтез поліпептидів з молекулярними масами 24000 і 21000 в результаті експресії довгого і короткого варіантів гена відповідно. Синтез імунологічно активного кор-антигену відбувається в бактерійних клітинах in vivo. За допомогою конкурентної радіоімунопреціпітації проведено орієнтовну оцінку виходу обох варіантів кор-антигену в клітинах Е. coli.
Повний текст: (PDF, російською)

References

[1] Tiollais P, Charnay P, Vyas GN. Biology of hepatitis B virus. Science. 1981;213(4506):406-11.
[2] Takahashi K, Akahane Y, Gotanda T, Mishiro T, Imai M, Miyakawa Y, Mayumi M. Demonstration of hepatitis B e antigen in the core of Dane particles. J Immunol. 1979;122(1):275-9.
[3] MacKay P, Lees J, Murray K. The conversion of hepatitis B core antigen synthesized in E coli into e antigen. J Med Virol. 1981;8(4):237-43.
[4] Blyuger AF, Novitsky IN. Practical Hepatology. Riga. Zvaigzne, 1984. 405p.
[5] Murray K, Bruce SA, Hinnen A, Wingfield P, van Erd PM, de Reus A, Schellekens H. Hepatitis B virus antigens made in microbial cells immunise against viral infection. EMBO J. 1984;3(3):645-50.
[6] Yamaki M, Ohori H, Onodera S, Ishida N, Maeda H. Circular dichroism and biochemical properties of the hepatitis B virus core antigen. Biochim Biophys Acta. 1982;706(2):165-73.
[7] Tiollais P., Wain-Iiobson S. Molecular genetics of the hepatitis B virus. In: Advances in Hepatitis Research Ed. F. V. Chisari. Massau, 1984, p. 9-20.
[8] Takahashi K, Machida A, Funatsu G, Nomura M, Usuda S, Aoyagi S, Tachibana K, Miyamoto H, Imai M, Nakamura T, Miyakawa Y, Mayumi M. Immunochemical structure of hepatitis B e antigen in the serum. J Immunol. 1983;130(6):2903-7.
[9] Pasek M, Goto T, Gilbert W, Zink B, Schaller H, MacKay P, Leadbetter G, Murray K. Hepatitis B virus genes and their expression in E. coli. Nature. 1979;282(5739):575-9.
[10] Edman JC, Hallewell RA, Valenzuela P, Goodman HM, Rutter WJ. Synthesis of hepatitis B surface and core antigens in E. coli. Nature. 1981;291(5815):503-6.
[11] Hardy K, Stahl S, Kupper H. Production in B. subtilis of hepatitis B core antigen and a major antigen of foot and mouth disease virus. Nature. 1981;293(5832):481-3.
[12] Stahl S, MacKay P, Magazin M, Bruce SA, Murray K. Hepatitis B virus core antigen: synthesis in Escherichia coli and application in diagnosis. Proc Natl Acad Sci U S A. 1982;79(5):1606-10.
[13] Cohen BJ, Richmond JE. Electron microscopy of hepatitis B core antigen synthesized in E. coli. Nature. 1982;296(5858):677-9.
[14] Ovchinnikov IuA, Sverdlov ED, Tsarev SA, Khodkova EM, Monastyrskaia GS. Direct expression of the gene of human leukocyte interferon F in Escherichia coli cells. Dokl Akad Nauk SSSR. 1982;265(1):238-42.
[15] Dagert M, Ehrlich SD. Prolonged incubation in calcium chloride improves the competence of Escherichia coli cells. Gene. 1979;6(1):23-8.
[16] Gergen JP, Stern RH, Wensink PC. Filter replicas and permanent collections of recombinant DNA plasmids. Nucleic Acids Res. 1979;7(8):2115-36.
[17] Birnboim HC, Doly J. A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA. Nucleic Acids Res. 1979;7(6):1513-23.
[18] Helfman DM, Feramisco JR, Fiddes JC, Thomas GP, Hughes SH. Identification of clones that encode chicken tropomyosin by direct immunological screening of a cDNA expression library. Proc Natl Acad Sci U S A. 1983;80(1):31-5.
[19] Chard T. An introduction to radioimmunoassay and related techniques. Amsterdam; New York; Oxford: North-Holland publ., 1976. 241 p.
[20] Colman A, Byers MJ, Primrose SB, Lyons A. Rapid purification of plasmid DNAs by hydroxyapatite chromatography. Eur J Biochem. 1978;91(1):303-10.
[21] Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970;227(5259):680-5.
[22] Bass IA, Danilevskaya ON, Mekhedov SL, Fedoseeva VB, Gorlenko ZM. The effect of rifampicin upon the transcription of RNA polymerase beta-gene in Escherichia coli. Mol Gen Genet. 1979;173(1):101-7.
[23] Pumpen PP, Dishler AV, Kozlovskaia TM, Bychko VV, Gren EIa. Cloning of hepatitis B virus DNA in Escherichia coli. Dokl Akad Nauk SSSR. 1981;260(4):1022-4.
[24] Pumpen PP, Kozlovskaia TM, Borisova GP, Bychko VV, Dishler AV. Synthesis of the surface antigen of the hepatitis B virus in Escherichia coli. Dokl Akad Nauk SSSR. 1983;271(1):230-4.
[25] Gubanov VV, Lebedev IuB, Monastyrskaia GS, Rubtsov PM, Skriabin KG. Primary structure of the E. coli DNA region preceding the tryptophan operon genes. Bioorg Khim. 1984;10(3):415-7.
[26] Zabeau M, Stanley KK. Enhanced expression of cro-beta-galactosidase fusion proteins under the control of the PR promoter of bacteriophage lambda. EMBO J. 1982;1(10):1217-24.
[27] Will H, Cattaneo R, Pfaff E, Kuhn C, Roggendorf M, Schaller H. Expression of hepatitis B antigens with a simian virus 40 vector. J Virol. 1984;50(2):335-42.