Biopolym. Cell. 1990; 6(2):31-35.
Моделювання генетичної корекції сімейної гіперхолестеринемії
1Должанська Н. Б., 1Мандельштам М. Ю., 1Паткін Е. Л., 1Кузнецов А. С., 2Виханска Ф. Л., 2Крутиліна Р. І., 1Гайцхокі В. С.
  1. Інститут експериментальної медицини АМН СРСР
    Ленінград, СРСР
  2. Інститут цитології АН СРСР
    Ленінград, СРСР

Abstract

Досліджували експресію рецептора ліпопротеїнів низької щільності (рЛНП) людини в клітинах лінії L929 (фібробласти миші), трансформованих рекомбінантною плазмідою pMSVL. Ця плазміда містить повнорозмірну кДНК рЛНП і гібридний промотор, що складається з регуляторних послідовностей промотору ранніх генів SV40 і енхансера вірусу саркоми Молоні, чутливого до глюкокортикоїдних гормонів. Методами дот-, блот-гібридизації РНК?кДНК і імунофлуоресцентного аналізу показано, що в трансформованих L- клітинах відбувається синтез рЛНП людини.

References

[1] Goldstein J. L., Brown M. S. Familial hypercholesterolemia. The metabolic basis of inherited disease. Eds J. B. Stanbury et al. New York: McGraw-Hill, 1978:672-712.
[2] Yamamoto T, Davis CG, Brown MS, Schneider WJ, Casey ML, Goldstein JL, Russell DW. The human LDL receptor: a cysteine-rich protein with multiple Alu sequences in its mRNA. Cell. 1984;39(1):27-38.
[3] Miyanohara A, Sharkey MF, Witztum JL, Steinberg D, Friedmann T. Efficient expression of retroviral vector-transduced human low density lipoprotein (LDL) receptor in LDL receptor-deficient rabbit fibroblasts in vitro. Proc Natl Acad Sci U S A. 1988;85(17):6538-42.
[4] Wilson JM, Johnston DE, Jefferson DM, Mulligan RC. Correction of the genetic defect in hepatocytes from the Watanabe heritable hyperlipidemic rabbit. Proc Natl Acad Sci U S A. 1988;85(12):4421-5.
[5] Selden RF, Skoskiewicz MJ, Howie KB, Russell PS, Goodman HM. Implantation of genetically engineered fibroblasts into mice: implications for gene therapy. Science. 1987;236(4802):714-8.
[6] Maniatis T., Fritsch E. F., Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab. press, 1982 545 p.
[7] Graham FL, van der Eb AJ. A new technique for the assay of infectivity of human adenovirus 5 DNA. Virology. 1973;52(2):456-67.
[8] Gough NM. Rapid and quantitative preparation of cytoplasmic RNA from small numbers of cells. Anal Biochem. 1988;173(1):93-5.
[9] Feinberg AP, Vogelstein B. A technique for radiolabeling DNA restriction endonuclease fragments to high specific activity. Anal Biochem. 1983;132(1):6-13.
[10] Larkin JM, Brown MS, Goldstein JL, Anderson RG. Depletion of intracellular potassium arrests coated pit formation and receptor-mediated endocytosis in fibroblasts. Cell. 1983;33(1):273-85.
[11] Anderson RG. Methods for visualization of the LDL pathway in cultured human fibroblasts. Methods Enzymol. 1986;129:201-16.