Biopolym. Cell. 2020; 36(6):433-445.
Методи
Трансфекція мезенхімальних стовбурових клітин при фізіологічних концентраціях кисню
1Шувалова Н. С., 1, 2Топорова О. К., 1, 2Кордюм В. А.
  1. ДУ «Інститут генетичної і регенеративної медицини НАМНУ»
    вул. Вишгородська, 67, Київ, Україна, 04114
  2. Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
    Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03143
Мета. Численні роботи показали позитивний вплив фізіологічних концентрацій кисню на культури мезенхімальних стовбурових клітин (МСК). Метою даної роботи було дослідження впливу фізіологічних концентрацій кисню на ефективність невірусної трансфекції МСК Вартонового студню (МСК-ВС). Методи. МСК-ВС на другому пассажі було культивовано 48 годин в різних газових сумішах: на основі азоту (кисень – 3 %, CO2–5 %, азот – 93 %), і на основі аргону (кисень – 3 %, CO2–5 %, аргон – 93 %). Контрольну групу тримали в стандарнтих умовах CO2 – інкубатора (атмосферна концентрація кисню, CO2–5 %). Після 48 годин культивування клітини було трансфіковано нанорозмірними поліплексами pEGFP-C1/PEI та pEGFP-C1/TurboFect, що містили 3 мкг плазмідної ДНК. Культури перебували в контакті з комплексами приблизно 1 годину, в умовах CO2 – інкубатора. Після чого дослідні культури було культивовано в зазначених вище газових сумішах (при 3 % кисню), а контрольну – та в умовах CO2 – інкубатора. Ефктивність трансфекції оцінювали за допомогою проточної цитофлюориметрії, як число флюоресцентних клітин, що експресують eGFP. Результати. У групах, які було культивовано в газових сумішах, що містили 3 % кисню, до та після процедури трансфекції, кількість клітин, що синтезують eGFP, була більшою в середньому у 2,58 в суміші на основі азоту, та 1,37 рази в суміші на основі аргону. Висновки. Культивування МСК-ВС за фізі-ологічних концентрацій кисню можна використовувати як метод підвищення ефективності невірусної трансфекції.
Keywords: мезенхімальні стовбурові клітини, Вартонів студень, невірусна трансфекція, трансфекція, гіпоксія, аргон