Biopolym. Cell. 2020; 36(2):99-109.
Структура та функції біополімерів
Біологічні властивості клітин лінії HEK293T, трансфікованої mCD150 та nCD150 ізоформами рецептора CD150/SLAMF1
1Шлапацька Л. М., 1Гордієнко І. М., 1Ковалевська Л. М., 1Сидоренко С. П.
  1. Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького
    вул. Васильківська, 45, Київ, Україна, 03022
Мета. З’ясувати роль mCD150 та nCD150 ізоформ рецептора CD150/SLAMF1 у регуляції проліферативної активності та колонієутворювальної здатності клітин лінії HEK293T. Методи. В роботі були використані методи культури клітин, трансфекції, кількісної ПЛР, проточної цитометрії, аналізу проліферації клітин, клітинного циклу, формування колоній та статистичні методи. Результати. В результаті трансфекції клітин лінії HEK293T послідовностями кДНК mCD150 та nCD150 ізоформ CD150 було отримано дві сублінії зі стабільною диференційною та виключно цитоплазматичною експресією цих ізоформ – HEK293T-pBABE-mCD150 та HEK293T-pBABE-nCD150. Клітини HEK293T, трансфіковані mCD150 та nCD150 ізоформами, характеризуються більш високою проліферативною активністю та рівнем експресії ядерного антигена проліферуючих клітин IPO38 порівняно з клітинами HEK293T та HEK293T-pBABE-puro. Аналіз розподілу клітин за фазами клітинного циклу виявив, що достовірно вищий відсоток клітин HEK293T-pBABE-mCD150 та HEK293T-pBABE-nCD150 перебуває у S і менший у G0/G1 фазі проти такого в клітинах HEK293T і HEK293T-pBABE-puro. Крім того, достовірно вищий відсоток клітин HEK293T, трансфікованих кДНК nCD150, але не mCD150 ізоформою, встановлено і у G2/M фазі клітинного циклу порівняно із клітинами контрольних субліній. З’ясовано, що за низької щільності посіву як клітини HEK293T-pBABE-mCD150, так і HEK293T-pBABE-nCD150 здатні формувати колонії, чого не спостерігається у клітинах HEK293T та HEK293-pBABE-puro. Висновок. mCD150 та nCD150 ізоформи мають властивості, що сприяють посиленню проліферативного та клоногенного потенціалу клітин з більш вираженим ефектом ізоформи nCD150.
Keywords: рецептор CD150/SLAMF1, mCD150 ізоформа, nCD150 ізоформа, лінія клітин HEK293T, проліферація, колонієутворення