Biopolym. Cell. 1987; 3(3):152-154.
Короткі повідомлення
Димеризація Ecodam-метилази, індукована олігонуклеотидним субстратом
1Речкунова Н. І., 1Зінов'єв В. В., 1Малигін Е. Г., 2Горбунов Ю. А., 2Попов С. Г., 1Нестеренко В. Ф., 2Бур'янов Я. І.
  1. ВНДІ молекулярної біології
    сел. Кольцово Новосибірська обл., СРСР
  2. Інститут біохімії та фізіології мікроорганізмів АН СРСР
    Пущино, Московська обл., СРСР

Abstract

Досліджено взаємодію Ecodam-метилази з 20-членним олігонуклеотидним дуплексом, що містить ділянку упізнавання ферменту. Методами гель-фільтрації та ультрацентрифугування у градієнті щільності сахарози виявлено збільшення молекулярної маси ферменту за присутності олігонуклеотидного субстрату в порівнянні з вихідним ферментом на величину, більшу молекулярної маси субстрату. Максимальне значення молекулярної маси комплексу спостерігали при еквімолярному співвідношенні ферменту і субстрату. Отримані результати підтверджують утворення димерної форми ферменту за присутності субстрату.

References

[1] Zinov'ev VV, Gorbunov IuA, Popov SG, Malygin EG, Bur'ianov IaI. Effect of Ecodam DNA-methylase on single-stranded sequences and synthetic oligonucleotides. Mol Biol (Mosk). 1985;19(4):947-54.
[2] Herman GE, Modrich P. Escherichia coli dam methylase. Physical and catalytic properties of the homogeneous enzyme. J Biol Chem. 1982;257(5):2605-12.
[3] Brooks JE, Blumenthal RM, Gingeras TR. The isolation and characterization of the Escherichia coli DNA adenine methylase (dam) gene. Nucleic Acids Res. 1983;11(3):837-51.
[4] Zinov'ev VV, Tuzikov FV, Malygin EG i dr. Study the stoichiometry of complexes by reacting Ecodam-methyltransferase with substrates by small-angle X-ray scattering. Conformational changes of biopolymers in solution: Mat. VI symp. (Tbilisi, 20-22 November 1985). Tbilisi, 1985; 56.
[5] Bur'ianov IaI, Zakharenko VN, Baev AA. Isolation, purification and properties of adenine DNA methylase Eco dam. Dokl Akad Nauk SSSR. 1981;259(6):1492-5.
[6] Hirose T, Grea R, Itakura K. Rapid synthesis of trideoxyribonucleotide blocks. Tetrahedron Lett. 1978; 17(28):2449-52.
[7] Martin RG, Ames BN. A method for determining the sedimentation behavior of enzymes: application to protein mixtures. J Biol Chem. 1961;236:1372-9.
[8] Siegel LM, Monty KJ. Determination of molecular weights and frictional ratios of proteins in impure systems by use of gel filtration and density gradient centrifugation. Application to crude preparations of sulfite and hydroxylamine reductases. Biochim Biophys Acta. 1966;112(2):346-62.