Biopolym. Cell. 2012; 28(6):429-433.
Структура та функції біополімерів
Альтернативно сплайсовані коротка і довга ізоформи адапторного білка інтерсектину 1 формують комплекси у клітинах ссавців
1, 2Губар О. С., 1Кропивко С. В., 1Циба Л. О., 2Гасман С., 1Риндич А. В.
  1. Державна ключова лабораторія молекулярної і клітинної біології
    Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
    вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680
  2. Інститут нейронаук і клітинних взаємодій, Університета Страсбурга
    вул. Блеза Пискля, 5, Страсбург, Франція, 67084

Abstract

Інтерсектин 1 (ITSN1) – адапторний білок, залучений до мембранного транспорту та передачі клітинних сигналів. Довга і коротка ізоформи ITSN1 (ITSN1-L і ITSN1-S) утворюються в результаті альтернативного сплайсингу. Метою роботи було встановити, чи можуть ITSN1-L і ITSN1-S взаємодіяти в клітинах ссавців. Методи. Використано методи імунопреципітації та конфокальної мікроскопії. Результати. Показано, що ендогенний ITSN1- S копреципітується з надекспресованим ITSN1-L у клітинах PC12, 293 і 293T. Довга і коротка ізоформи ITSN1 також колокалізуються у клітинах 293T. Висновки. ITSN1-L і ITSN1-S формують комплекси в клітинах ссавців.
Keywords: ITSN1, альтернативно сплайсовані ізоформи, адапторні білки

References

[1] Hussain N. K., Yamabhai M., Ramjaun A. R., Guy A. M., Baranes D., O'Bryan J. P., Der C. J., Kay B. K., McPherson P. S. 1999 Splice variants of intersectin are components of the endocytic machinery in neurons and nonneuronal cells J. Biol. Chem 274, N 22:15671–15677.
[2] Predescu S. A., Predescu D. N., Timblin B. K., Stan R. V., Malik A. B. 2003 Intersectin regulates fission and internalization of caveolae in endothelial cells Mol. Biol. Cell 14, N 12 P. 4997– 5010.
[3] Momboisse F., Ory S., Calco V., Malacombe M., Bader M. F., Gasman S. 2009 Calcium-regulated exocytosis in neuroendocrine cells: intersectin-1L stimulates actin polymerization and exocytosis by activating Cdc42 Ann. NY Acad. Sci 1152 P. 209–214.
[4] Pechstein A., Bacetica J., Vahedi-Faridi A., Gromovaa K., Sundborgerb A., Tomlinb N., Krainerc G., Vorontsova O., Schafera J. G., Owed S. G., Cousine M. A., Saengera W., Shupliakov O., Haucke V. 2010 Regulation of synaptic vesicle recycling by complex formation between intersectin 1 and the clathrin adaptor complex AP2 Proc. Natl Acad. Sci. USA 107, N 9 P. 4206–4211.
[5] Tong X., Hussain N. K., Adams A. G., O'Bryan J. P., McPherson P. S. 2000 Intersectin can regulate the Ras/MAP kinase pathway independent of its role in endocytosis J. Biol. Chem 275, N 38:29894–29899.
[6] Adams A., Thorn J. M., Yamabhai M., Kay B. K., O'Bryan J. P. 2000 Intersectin, an adaptor protein involved in clathrin-mediated endocytosis, activates mitogenic signaling pathways J. Biol. Chem 275, N 35:27414–27420.
[7] Novokhatska O. V., Skrypkina I. Ya., Dergai M. V., Tsyba L. O., Rynditch A. V. 2012 RTK signaling regulator SPRY2 associates with endocytic adaptor ITSN1 in vivo Biopolym. Cell 28, N 4:314–316.
[8] Das M., Scappini E., Martin N. P., Wong K. A., Dunn S., Chen Y. J., Miller S. L., Domin J., O'Bryan J. P. 2007 Regulation of neuron survival through an intersectin-phosphoinositide 3'-kinase C2 beta-AKT pathway Moll. Cell. Biol 27, N 22:7906–7917.
[9] Scappini E., Koh T. W., Martin N. P., O'Bryan J. P. 2007 Intersectin enhances huntingtin aggregation and neurodegeneration through activation of c-Jun-NH2-terminal kinase Hum. Mol. Genet 16, N 15:1862–1871.
[10] Keating D. J., Chen C., Pritchard M. A. 2006 Alzheimer's disease and endocytic dysfunction: clues from the Down syndrome-related proteins, DSCR1 and ITSN1 Ageing Res. Rev 5, N 4 P. 388–401.
[11] Ma Y., Wang B., Li W., Liu X., Wang J., Ding T., Zhang J., Ying G., Fu L., Gu F. 2011 Intersectin1-s is involved in migration and invasion of human glioma cells J. Neurosci. Res 89, N 7 P. 1079–1090.
[12] Russo A., O'Bryan J. P. 2012 Intersectin 1 is required for neuroblastoma tumorigenesis Oncogene 31, 4828-4834
[13] Guipponi M., Scott H. S., Chen H., Schebesta A., Rossier C., Antonarakis S. E. 1998 Two isoforms of a human intersectin (ITSN) protein are produced by brain-specific alternative splicing in a stop codon Genomics 53, N 3:369–376.
[14] Morgan J. R., Prasad K., Jin S., Augustine G. J., Lafer E. M. 2003 Eps15 homology domain-NPF motif interactions regulate clathrin coat assembly during synaptic vesicle recycling J. Biol. Chem 278, N 35:33583–33592.
[15] Li S. S. 2005 Specificity and versatility of SH3 and other proline-recognition domains: structural basis and implications for cellular signal transduction Biochem. J 390, pt 3:641–653.
[16] Hussain N. K., Jenna S., Glogauer M., Quinn C. C., Wasiak S., Guipponi M., Antonarakis S. E., Kay B. K., Stossel T. P., Lamarche-Vane N., McPherson P. S. 2001 Endocytic protein intersectin-1 regulates actin assembly via Cdc42 and N-WASP Nat. Cell. Biol 3, N 10:927–932.
[17] Good M. C., Zalatan J. G., Lim W. A. 2011 Scaffold proteins: hubs for controlling the flow of cellular information Science 332, N 6030:680–686.
[18] Maignan S., Guilloteau J. P., Fromage N., Arnoux B., Becquart J., Ducruix A. 1995 Crystal structure of the mammalian Grb2 adaptor Science 268, N 5208:291–293.
[19] Elion E. A. The Ste5p scaffold J. Cell. Sci 2001 114, N 22 P. 3967–3978.
[20] Dergai M., Skrypkina I., Dergai O., Tsyba L., Novokhatska O., Filonenko V., Drobot L., Rynditch A. 2011 Identification and characterization of a novel mammalian isoform of the endocytic adaptor ITSN1 Gene 485, N 2:120–129.
[21] Dergai M. V., Dergai O. V., Tsyba L. O., Novokhatska O. V., Skrypkina I. Ya., Rynditch A. V. 2011 Novel isoform of adaptor protein ITSN1 forms homodimers via its C-terminus Biopolym. Cell 27, N. 4:306–309.
[22] Nikolaienko O., Skrypkina I., Tsyba L., Fedyshyn Y., Morderer D., Buchman V., de la Luna S., Drobot L., Rynditch A. Intersectin 1 forms a complex with adaptor protein Ruk/CIN85 in vivo independently of epidermal growth factor stimulation Cell. Signal 2009 21, N 5:753–759.
[23] Morderer D., Nikolaienko O., Skrypkina I., Cherkas V., Tsyba L., Belan P., Rynditch A. Endocytic adaptor protein intersectin 1 forms a complex with microtubule stabilizer STOP in neurons Gene 2012 505, N 2:360–364.
[24] Dergai O., Novokhatska O., Dergai M., Skrypkina I., Tsyba L., Moreau J., Rynditch A. Intersectin 1 forms complexes with SGIP1 and Reps1 in clathrin-coated pits Biochem. Biophys. Res. Commun 2010 402, N 2:408–413.
[25] Gubar O. S., Houy S., Billuart P., Kropyvko S. V., Tsyba L. O., Gasman S., Rynditch A. V. 2012 GTPase-activating protein oligophrenin 1 is a new partner of multifunctional adapter protein intersectin 1 Biopolym. Cell 28, N 5:357–362.
[26] Cupers P., ter Haar E., Boll W., Kirchhausen T. Parallel dimers and anti-parallel tetramers formed by epidermal growth factor receptor pathway substrate clone 15 J. Biol. Chem 1997 272, N 52:33430–33434.
[27] Wong K. A., Wilson J., Russo A., Wang L., Okur M. N., Wang X., Martin N. P., Scappini E., Carnegie G. K., O'Bryan J. P. Intersectin (ITSN) family of scaffolds function as molecular Hubs in protein interaction networks PLoS One 2012 7, N 4 e36023.
[28] Kristensen O., Guenat S., Dar I., Allaman-Pillet N., Abderrahmani A., Ferdaoussi M., Roduit R., Maurer F., Beckmann J. S., Kastrup J. S., Gajhede M., Bonny C. A unique set of SH3-SH3 interactions controls IB1 homodimerization EMBO J 2006 25, N 4:785–797.
[29] Levinson N. M., Visperas P. R., Kuriyan J. The tyrosine kinase Csk dimerizes through Its SH3 domain PLoS One 2009 4, N 11 e7683.