Biopolym. Cell. 2012; 28(5):368-373.
Геноміка, транскриптоміка та протеоміка
Вплив екзогенних фітогормонів, метилжасмонату та супресорів біосинтезу жасмонату на Agrobacterium- опосередковану транзієнтну експресію в Nicotiana excelsior
1Сіндаровська Я. Р., 1Герасименко І. М., 1Кучук М. В., 1Шелудько Ю. В.
  1. Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
    вул. Академіка Заболотного, 148, Київ, Україна, 03680

Abstract

Мета. Дослідження впливу деяких екзогенних агентів на накопичення рекомбінантного білка в рослинах за допомогою Agrobacterium-опосередкованої транзієнтної експресії. Методи. Agrobacterium-опосередкована транзієнтна експресія, спектрофотометричні методи для аналізу білків, статистичні розрахунки. Результати. Показано, що протестовані речовини, а саме – деякі концентрації ауксинів, цитокініну, метилжасмонату і супресорів його біосинтезу (фенідону і диетилдитіокарбамату), додані до інфільтраційного буфера, не впливають на транзієнтну експресію GFP і загальний рівень вмісту білка в рослинній тканині. Висновки. Результати свідчать, що протестовані фактори не є суттєвими для проведення Agrobacterium-опосередкованої транзієнтної експресії.
Keywords: Nicotiana excelsior, Agrobacterium, транзієнтна експресія, GFP

References

[1] Fraley R. T., Horsch R. B., Matzke A., Chilton M., Chilton W. S., Sanders P. R. In vitro transformation of petunia cells by an improved method of cocultivation with A. tumefaciens strains Plant Mol. Biol 1984 3, N 6:371–378.
[2] Horsch R. B., Klee H. J. Rapid assay of foreign gene expression in leaf discs transformed by Agrobacterium tumefaciens: Role of T-DNA borders in the transfer process Proc. Natl Acad. Sci. USA 1986 83, N 12:4428–4432.
[3] Gleba Y., Klimyuk V., Marillonnet S. Magnifection – a new platform for expressing recombinant vaccines in plants Vaccine 2005 23, N 17–18:2042–2048.
[4] Gleba Y., Klimyuk V., Marillonnet S. Viral vectors for the expression of proteins in plants Curr. Opin. Biotechnol 2007 18, N 2:134–141.
[5] Giritch A., Marillonnet S., Engler C. van Eldik G., Botterman J., Klimyuk V., Gleba Y. Rapid high-yield expression of full-size IgG antibodies in plants coinfected with noncompeting viral vectors Proc. Natl Acad. Sci. USA 2006 103, N 40:14701– 14706.
[6] Sheludko Y. V. Agrobacterium-mediated transient expression as an approach to production of recombinant proteins in plants Recent Pat. Biotechnol 2008 2, N 3:198–208.
[7] Sheludko Y. V., Sindarovska Y. R., Gerasymenko I. M., Bannikova M. A., Kuchuk N. V. Comparison of several Nicotiana species as hosts for high-scale Agrobacterium-mediated transient expression Biotechnol. Bioeng 2007 96, N 3:608–614.
[8] Wroblewski T., Tomczak A., Michelmore R. Optimization of Agrobacterium-mediated transient assays of gene expression in lettuce, tomato and Arabidopsis Plant Biotechnol. J 2005 3, N 2:259–273.
[9] Buyel J. F., Fischer R. Predictive models for transient protein expression in tobacco (Nicotiana tabacum L.) can optimize process time, yield, and downstream costs Biotechnol. Bioeng 2012 109, N 10:2575–2588.
[10] Schwechheimer C., Schwager K. Regulated proteolysis and plant development Plant Cell Rep 2004 23, N 6:353–364.
[11] Guilfoyle T. J., Hagen G. Auxin response factors Curr. Opin. Plant Biol 2007 10, N 5:453–460.
[12] Plant Biochemistry / Eds H. W. Heldt, F. Heldt Burlington, San Diego: Elsevier, 2005 630 p.
[13] Nath P., Sane V. A., Sane A.P., Trivedi P. K. Plant gene expression, regulation of Encyclopedia of molecular cell biology and molecular medicine / Ed. R. A. Meyers Weinheim: WileyVCH Verlag GmbH & Co. KGaA, 2005 Vol. 10:307–355.
[14] Haberer G., Kieber J. J. Cytokinins. New insights into a classic phytohormone Plant Physiol 2002 128, N 2:354–362.
[15] Memelink J. Regulation of gene expression by jasmonate hormones Phytochemistry 2009 70, N 13–14:1560–1570.
[16] Reinbothe S., Mollenhauer B., Reinbothe C. JIPs and RIPs: the regulation of plant gene expression by jasmonates in response to environmental cues and pathogens Plant Cell 1994 6, N 9:1197–1209.
[17] Koch T., Krumm T., Jung V., Engelberth J., Boland W. Differential induction of plant volatile biosynthesis in the lima bean by early and late intermediates of the octadecanoid-signaling pathway Plant Physiol 1999 121, N 1:153–162.
[18] Heil M., Koch T., Hilpert A., Fiala B., Boland W., Linsenmair K. E. Extrafloral nectar production of the ant-associated plant, Macaranga tanarius, is an induced, indirect, defensive response elicited by jasmonic acid Proc. Natl Acad. Sci. USA 2001 98, N 3:1083–1088.
[19] Farmer E. E., Caldelari D., Pearce G., Walker-Simmons M. K., Ryan C. A. Diethyldithiocarbamic acid inhibits the octadecanoid signaling pathway for the wound induction of proteinase inhibitors in tomato leaves Plant Physiology 1994 106, N 1:337–342.
[20] Voinnet O., Rivas S., Mestre P., Baulcombe D. An enhanced transient expression system in plants based on suppression of gene silencing by the p19 protein of tomato bushy stunt virus Plant J 2003 33, N 5:949–956.
[21] Sindarovska Y. R., Gerasymenko I. M., Sheludko Y. V., Olevinskaja Z. M., Spivak N. Y., Kuchuk N. V. Production of human interferon alpha 2b in plants of Nicotiana excelsior by Agrobacterium-mediated transient expression Tsitol. Genet 2010 44, N 5:60–64.
[22] Bradford M. M. A rapid and sensitive method for the quantification of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding Anal. Biochem 1976 72:248–254.
[23] Lakin F. G. Biometry Moscow: Vysshaya shkola, 1990 350 p.
[24] Smigocki A. C., Owens L. D. Cytokinin-to-auxin ratios and morphology of shoots and tissues transformed by a chimeric isopentenyl transferase gene Plant Physiol 1989 91, N 3:808–811.
[25] Novakova M., Motyka V., Dobrev P. I., Malbeck J., Gaudinova A., Vankova R. Diurnal variation of cytokinin, auxin and abscisic acid levels in tobacco leaves J. Exp. Bot 2005 56, N 421:2877–2883.
[26] Scott I. M., Horgan R. Mass-spectrometric quantification of cytokinin nucleotides and glycosides in tobacco crown-gall tissue Planta 1984 161, N 4:345–354.
[27] Werner T., Motyka V., Strnad M., Schmulling T. Regulation of plant growth by cytokinin Proc. Natl Acad. Sci. USA 2001 98, N 18:10487–10492.
[28] Gundlach H., Muller M. J., Kutchan T. M., Zenk M. H. Jasmonic acid is a signal transducer in elicitor-induced plant cell cultures Proc. Natl Acad. Sci. USA 1992 89, N 6:2389–2393.
[29] Smith J. L., De Moraes C. M., Mescher M. C. Jasmonateand salicylate-mediated plant defense responses to insect herbivores, pathogens and parasitic plants Pest Manag. Sci 2009 65, N 5:497–503.
[30] Wasternack C. Jasmonates: an update on biosynthesis, signal transduction and action in plant stress response, growth and development Ann. Bot 2007 100, N 4:681–697.