Biopolym. Cell. 2011; 27(1):47-52.
Молекулярна та клітинна біотехнології
Нанорозмірний ліпосомний контейнер iз «сигнальною системою» для спрямованої доставки речовин у живі клітини
1Єфімова С. Л., 1Лебедь А. С., 1Гуральчук Г. Я., 1Сорокін А. В., 2Курильченко І. Ю., 1Кавок Н. С., 1Малюкін Ю. В.
  1. Інститут сцинтиляційних материалів НАН України
    Пр. Леніна, 60, Харків, Україна, 61001
  2. Слав'янский державний педагогіческий університет
    вул. Генерала Батюка, 19, м. Слав'янск, Донецька область, Україна, 84116

Abstract

Мета. Встановити можливість оснащення ліпосомних «контейнерів», які використовують для спрямованої доставки речовин у живі клітини, «сигнальною системою» для відстеження взаємодії ліпосом з клітинами у часі. Методи. Використано методи флуоресцентної мікроскопії, флуоресцентної спектроскопії і мікроспектроскопії. Результати. Із застосуванням ефекту безвипромінювального перенесення енергії електронного збудження (БПЕ) від зонда-донора DiO до зонда-акцептора DiI, інкорпорованих у ліпідні бішари фосфатидилхоліну (РС) ліпосом, вивчено процес входження гідрофобних флуоресцентних зондів у клітину. Визначено, що після 3 год інкубації клітин гепатоцитів з ліпосомами, у яких спостерігається БПЕ між парою зондів, сигнал БПЕ практично зникає, у той час як флуоресценція донора DiO стає дуже інтенсивною. Висновки. Ефект втрати сигналу БПЕ можна використовувати як «сигнальну систему» для моніторингу взаємодії ліпосоми з клітиною та доставки активної речовини у клітину.
Keywords: ліпосоми, флуоресцентні зонди, клітини, безвипромінювальне перенесення енергії

References

[1] Torchilin V., Weissig V. Liposomes. A practical approach series Oxford: Univ. press, 2003 396 p.
[2] Kozubek A., Gubernator J., Przeworska E., Stasiuk M. Liposomal drug delivery, a novel approach: PLARosomes Acta Biochim. Pol 2000 47, N 3 P. 639–649.
[3] Goyal P., Goyal K., Vijaya Kumar S. G., Singh A., Katare O. P., Mishra D. N. Liposomal drug delivery systems – clinical applications Acta Pharm 2005 55, N 1 P. 1–25.
[4] Hauglang R. P. Handbook of fluorescent probes and research products New York: Molecular probes, 2002 966 p.
[5] Lakowicz J. R. Principles of fluorescence spectroscopy New York: Plenum press, 1999 725 p.
[6] Chen H., Kim S., He W., Wang H., Low P. S., Park K., Cheng J.-X. Fast release of lipophilic agents from circulating PEGPDLLA micelles revealed by in vivo Forster resonance energy transfer imaging Langmuir 2008 24, N 10 P. 5213– 5217.
[7] Chen H., Kim S., Li L., Wang S., Park K., Cheng J.-X. Release of hydrophobic molecules from polymer micelles into cell membranes revealed by Forster resonance energy transfer imaging Proc. Natl Acad. Sci. USA 2008 105, N 18 P. 6596–6601.
[8] Mui B., Chow L., Hope M. J. Extrusion technique to generate liposomes of defined size Meth. Enzymol 2003 367 P. 3–14.
[9] Petrenko A., Sukach A. N., Roslyakov A. D. Isolation of rat hepatocytes by a nonenzymatic method: detoxifying and respiratory activity Biokhimiia 1991 56, N 9 P. 1647–1651.
[10] Loura L. M. S., Fedorov A., Prieto M. Partition of membrane probe in a gel/fluid two-component lipid system: a fluorescence resonance energy transfer study Biochim. Biophys. Acta 2000 1467, N 1 P. 101–112.
[11] Lebed' A. S., Yefimova S. L., Guralchuk G. Ya., Sorokin A. V., Borovoy I. A., Malyukin Yu. V. Effect of hydrophobicity of cationic carbocyanine dyes DiOCn on their binding to anionic surfactant micelles J. Appl. Spectrosc 2010 77, N 2 P. 183–188.
[12] Kaplun A. P., Son L. B., Krasnopol'skii Yu. M., Shvets V. I. Liposomes and other nanoparticles as drug delivery systems Vopr. Med. Khim 1999 45, N 1 P. 3–12.