Biopolym. Cell. 1998; 14(2):127-131.
Структура та функції біополімерів
Фагозалежний суперсинтез β-галактозидази Escherichia coli та розробка способу її очистки
1Черних С. І., 1Славченко І. Ю., 1Горлов Ю. І., 1Терентьєв А. Г., 1Гавриш Т. Г., 1Кордюм В. А.
  1. Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
    Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680

Abstract

Розроблено спосіб одержання ферменту β-галактозидази (ЕС 3.2.1.23) у клітинах Е. coli з використанням бактеріофага. Вихід ферменту складав 700 од. активності в 1 мл культурального середовища. Накопичення ферменту в культуральному середовищі дозволило використати для попередньої очистки β-галактозидази мембранну техніку. Сконцентрований та частково очищений препарат β-галактозидази доочищували методом ліганд-афінної хроматографії. Кінцевий препарат β-галактозидази характеризувався високим ступенем очистки і нативності. Процеси отримання і очистки ферменту β -галактозидази

References

[1] Kaul R, D'Souza SF, Nadkarni GB. Hydrolysis of milk lactose by immobilized beta-galactosidase-hen egg white powder. Biotechnol Bioeng. 1984;26(8):901-4.
[2] Houts Sandra S. Lactose intolerance. Food Technol. 1988. 42(3):110-3.
[3] Gibbons I, Skold C, Rowley GL, Ullman EF. Homogeneous enzyme immunoassay for proteins employing beta-galactosidase. Anal Biochem. 1980;102(1):167-70.
[4] Freytag JW. Affinity column mediated immunoenzymometric assay. In: Enzyme-mediated immunoassay. Eds. TT Ngo, HM Lemhoff. Plenum Press New York 1985 277-298.
[5] Li XL, Robbins JW Jr, Taylor KB. The production of recombinant beta-galactosidase in Escherichia coli in yeast extract enriched medium. J Ind Microbiol. 1990;5(2-3):85-93.
[6] Kane JF, Hartley DL. Formation of recombinant protein inclusion bodies in Escherichia coli. Trends Biotechnol. 1988;6(5):95–101.
[7] AS. USSR N 1593232 Al. A method of producing ?-galactosidase. VA Kordyum, SI Chernykh, IYu Slavchenko, VG Korobko. 15.05.1990.
[8] Griffith KL, Wolf RE Jr. Measuring beta-galactosidase activity in bacteria: cell growth, permeabilization, and enzyme assays in 96-well arrays. Biochem Biophys Res Commun. 2002;290(1):397-402. Erratum in: Biochem Biophys Res Commun 2002 Mar 22;292(1):292.
[9] Affinity chromatography: a practical approach : Ed PD Dean, WS Johnson, FA Middle, IRL Press, Oxford, Washington, 1985, 215 p.