Biopolym. Cell. 1985; 1(5):234-241.
Огляди
Синтез на однонитковій кільцевій ДНК фага М13, який спрямовується ДНК-полімеразою вірусу ядерного поліедрозу тутового шовкопряда
1Атаєва Д. О., 1Марлиєв К. А., 1Куллиєв П. К., 2Михайлов В. С.
  1. Інститут зоології Туркменської РСР
    Ашхабад, СРСР
  2. Інститут біології розвитку ім. Н. К. Кольцова АН СРСР
    Москва, СРСР

Abstract

З лялечок шовковичного шовкопряда Bombух mori, інфікованих вірусом ядерного поліедрозу (ВЯП), виділено вірусоспеціфічну ДНК-полімеразу (ВЯП-полімеразу), ВЯП-полімераза представляє собою поліпептид з молекулярною масою 136 000 і коефіцієнтом седиментації 6,3 S. Фермент надає перевагу як матриці poly (dA) із затравкою (dT)10 і не активний при використанні poly (А). Частково очищена ВЯП-полімераза активна на однонитчастій кільцевій ДНК фага М13 за відсутності затравки. Здатність до синтезу на ДНК М13 обумовлена присутністю в препаратах ВЯП-полімерази Mg2+-залежної ендонуклеази, специфічної щодо двунитчастих ділянок ДНК. Ендонуклеаза присутня в препаратах ВЯП-полімерази після фракціонування екстракту інфікованих лялечок сульфатом амонію, хроматографії на фосфоцелюлозі і оксиапатиті, але може бути відокремлена від ВЯП-полімерази при ультрацентрифугуванні в градієнті концентрації гліцерину за присутності 200 мМ фосфату калію. При зниженні концентрації солі ВЯП-полімераза і ендонуклеаза виявляють тенденцію до агрегації.

References

[1] Miller LK, Jewell JE, Browne D. Baculovirus induction of a DNA polymerase. J Virol. 1981;40(1):305-8.
[2] Wang X, Kelly DC. Baculovirus replication: purification and identification of the Trichoplusia ni nuclear polyhedrosis virus-induced DNA polymerase. J Gen Virol. 1983; 64(10):2229-2236.
[3] Zinder ND, Boeke JD. The filamentous phage (Ff) as vectors for recombinant DNA--a review. Gene. 1982;19(1):1-10.
[4] Zasloff M, Ginder GD, Felsenfeld G. A new method for the purification and identification of covalently closed circular DNA molcules. Nucleic Acids Res. 1978;5(4):1139-52.
[5] Onodera K, Komano T, Himeno M, Sakai F. The nucleic acid of nuclear-polyhedrosis virus of the silkworm. J Mol Biol. 1965;13(2):532-9.
[6] Mikhailov VS, Gulyamov DB. Changes in DNA polymerase alpha, beta, gamma activities during early development of the teleost fish Misgurnus fossilis (loach). Eur J Biochem. 1983;135(2):303-6.
[7] Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970;227(5259):680-5.
[8] Oakley BR, Kirsch DR, Morris NR. A simplified ultrasensitive silver stain for detecting proteins in polyacrylamide gels. Anal Biochem. 1980;105(2):361-3.
[9] Mikhailov VS, Guliamov DB. Isolation of two forms of DNA polymerase alpha from roe of loach. Physico-chemical properties of the isoenzymes. Biokhimiia. 1983;48(9):1530-7.
[10] Ryndich AV, Sutugina LP, Kavsan VM etc. DNA polymerase activity of nuclear polyhedrosis virus large Wax moth. Dokl AN SSSR ser B, 1975; (4):347-349.
[11] Mikhailov B, Atayeva DO, Marlyev KA, Kullyev PK. Isolation of the replication complex comprising a DNA polymerase ? primase and a DNA of the silkworm silkworm Bombyx mori. Dokl AN SSSR. 1984; 275(2):502-505.