Виділення і характеристика лейцил-тРНК-синтетази з тканин ссавців
DOI:
https://doi.org/10.7124/bc.000023Анотація
Описано метод виділення лейцил-тРНК-синтетази (лейРС) з печінки кроля і міокарда свині. На відміну від ферменту печінки лейРС міокарда при хроматографії на оксиапатиті розділяється на два компоненти (E1 і Е2). Молекулярні маси ферментів, встановлені методом електрофорезу в поліакриламідному гелі, становлять 185 000 і 158 000 для лейРС печінки кроля і Е1 міокарда свині відповідно. Визначено, що Е2 містить аміноацил-тРНК-синтетазні активності інших амінокислотних специфічностей і представляє собою комплекс ферментів з молекулярною масою приблизно 800 000. Вивчено оптимальні умови реакції аміноацилювання, каталізованої лейРС печінки і міокарда, та визначено кінетичні параметри реакції.Посилання
Joachimiak A, Barciszewski J. Amino acid:tRNA ligases (EC 6.1.1..-). FEBS Lett. 1980;119(2):201-11.
Gudzera OI, El'skaia AV, Ovcharenko GV, Ivanov LL, Baturina ID. Purification and properties of leucyl-tRNA synthetase from the cow mammary gland. Mol Biol (Mosk). 1979;13(3):550-8.
Hedrick JL, Smith AJ. Size and charge isomer separation and estimation of molecular weights of proteins by disc gel electrophoresis. Arch Biochem Biophys. 1968;126(1):155-64.
Hayashi H, Knowles JR, Katze JR, Lapointe J, S?ll D. Purification of leucyl transfer ribonucleic acid synthetase from Escherichia coli. J Biol Chem. 1970;245(6):1401-6.
Cornish Baudouin E. Principles of enzyme kinetics. M.: Mir, 1979. 280.
Legocki AB, Pawelkiewicz J. Amino acid-activating enzymes in yellow lupin seeds, and purification of leucyl-sRNA synthetase. Acta Biochim Pol. 1967;14(3):313-22.
Dang CV, Johnson DL, Yang DC. High molecular mass amino acyl-tRNA synthetase complexes in eukaryotes. FEBS Lett. 1982;142(1):1-6.
Deutscher MP, Ni RC. Purification of a low molecular weight form of rat liver arginyl-tRNA synthetase. J Biol Chem. 1982;257(11):6003-6.
Vellekamp GJ, Kull FJ. Allotropism in aspartyl-tRNA synthetase from procine thyroid. Eur J Biochem. 1981;118(2):261-9.
