Зони особливого стану интерфазного хроматину
DOI:
https://doi.org/10.7124/bc.000378Анотація
Показано можливість введення до еукаріотичної клітини RecA-білка Е. coli із збереженням його біологічної активності. На цитологічному рівні (непрямий імунофлюоресцентний метод з цитофотометрією) визначено характер зв'язування RecA- білка з хроматином різного ступеню спіралізації на окремих стадіях клітинного циклу (у мета- і анафазних хромосомах білок не тестується). Присутність бактеріального білка у цитоплазмі і ядрах клітин in vivo та in vitro підтверджена також імуноелектронною мікроскопією. Виходячи з отриманих експериментальних даних та враховуючи переважне зв'язування RecA-білка з онДНК, зроблено припущення про існування зон особливого стану хроматина (ЗOCX), які характеризуються активним зв'язуванням з сироваткою до бактеріального RecA-білка та інтенсивною флюоресценцією і можуть відповідати зібраним у кластери активно експресуючим генам. Експерименти виконано на культурах клітин HeLa і Ltk–, а також in vivo на гепатоцитах після прямого введення білка та плазміди pKCR2 у складі ліпосом до печінки дорослих мишей лінії BALB/c.Посилання
Lantsov VA. Bacterial RecA protein: a biochemical, genetic and physicochemical analysis. Genetika. 1985;21(9):1413-27.
Khesin RB. Genome instability. Moscow, Nauka, 1984; 472 p.
Mallick U, FjCihamsdorf HJ, Herrlich P. Protein «X» synthesis in mammalian cells. V Chromosome damage and repair: proc. NATO adv. study ins New York 1981:199-204.
Kmiec EB, Kroeger PE, Brougham MJ, Holloman WK. Topological linkage of circular DNA molecules promoted by Ustilago rec 1 protein and topoisomerase. Cell. 1983;34(3):919-29.
Tomkinson AE, Linn S. Purification and properties of a single strand-specific endonuclease from mouse cell mitochondria. Nucleic Acids Res. 1986;14(24):9579-93.
Cassuto E, Lightfoot LA, Howard-Flanders P. Partial purification of an activity from human cells that promotes homologous pairing and the formation of heteroduplex DNA in the presence of ATP. Mol Gen Genet. 1987;208(1-2):10-4.
Angulo JF, Moreau PL, Maunoury R, Laporte J, Hill AM, Bertolotti R, Devoret R. KIN, a mammalian nuclear protein immunologically related to E. coli RecA protein. Mutat Res. 1989;217(2):123-34.
Shpilevaya SP, Kostetsky IE, Stolar TV, Likhachova LI, Zharova LG, Spivak IM, Zhestyanikov VD, Kordyum VA, Irodov DM. Interaction RecA-protein with nuclei chromatin (the cytological aspect). Biopolym Cell. 1991; 7(3):54-9.
Spivak IM, Kostetsky IE, Shpielevaya SP, Kordyum VA, Zhestyanikov VD. Caffeine-induced reduction of the survival of gamma-irradiated HeLa cells and the reversal of the caffeine effect by Escherichia coli RecA protein. Mutat Res. 1991;246(1):103-7.
Spivak IM, Kostetsky IE, Shpilevaya SP et al. Recovery caffeine reduced survival of gamma-irradiated cells HeLa RecA protein of E. coli. Tsitologiia. 1989; 31(6): 11-26.
Weinstock GM, McEntee K, Lehman IR. ATP-dependent renaturation of DNA catalyzed by the recA protein of Escherichia coli. Proc Natl Acad Sci U S A. 1979;76(1):126-30.
Cotterill SM, Satterthwait AC, Fersht AR. recA protein from Escherichia coli. a very rapid and simple purification procedure: binding of adenosine 5'-triphosphate and adenosine 5'-diphosphate by the homogeneous protein. Biochemistry. 1982;21(18):4332-7.
Kostetsky IE. Effect of lipids and RecA protein of E. coli at the level of transformation of yeast Saccharomyces cerevisiae: Author. dis. ... kand. biol. nauk. Kiev, 1990. 20 p.
O'Hare K, Benoist C, Breathnach R. Transformation of mouse fibroblasts to methotrexate resistance by a recombinant plasmid expressing a prokaryotic dihydrofolate reductase. Proc Natl Acad Sci U S A. 1981;78(3):1527-31.
Kostetsky IE, Shpilevaya SP, Likhacheva LI, Zharova LC, Irodov DM, Kirillova VS, Kordium VA. Expression of Escherichia coli ?-Galactosidase in murine hepatocytes. Biopolym Cell. 1989; 5(2):51-8.
Shpilevaya SP, Kostetsky IE, Likhacheva LI, Zharova LG, Irodov DM, Usenko EV, Stolyar TV, Kordium VA. Comparative studies in efficiency of expression of bacterial ?-galactosidase in vivo by the immunofluorescence method. Biopolym Cell. 1990; 6(1):63-6.
Bilich KM, Irodov DM, Kordium VA. Some ultrastructural aspects of direct injection of liposomes with inclosed plasmid DNA into mice liver. Biopolym Cell. 1990; 6(1):73-82.
Shchelkunov SN. Cloning genes. M.: Nauka, 1986. 226 p.
Zilber A. Immunological analysis. Moscow, Medicine, 1968; 185 p.
Ernst B, Tesman D. Immunology. Immunological Methods. M. : Mir, 1979:373-413.
Silver MM, Hearn SA. Postembedding immunoelectron microscopy using protein A-gold. Ultrastruct Pathol. 1987;11(5-6):693-703. Review.
Derenzini M, Lorenzoni E, Marinozzi V, Barsotti P. Ultrastructural cytochemistry of active chromatin in regenerating rat hepatocytes. J Ultrastruct Res. 1977;59(3):250-62.
Polikar A. Elements of cell physiology. L. Nauka, 1976. 389 p.
Chen DS, Bernstein H. Yeast rec gene rad52 can functionally substitute for phage t4 rec genes 46 and 47. J Cell Biochem. 1988; Suppl. 12A: 284.
