Експресія у Esherichia coli гена ангіогеніну людини, трансляційно злитого з N-кінцевим фрагментомβ-галактозидази
DOI:
https://doi.org/10.7124/bc.000284Анотація
Методом олігонуклеотид-направленого мутагенезу з фага М13mp8 з проклонованим синтетичним геном ангіогеніну людини отримано фаг М13mp8, що кодує злитий білок ангіогенін-α-пептид β-галактозидази Е. coli (фаг M1-1). Продемонстровано, що в клітинах, інфікованих фагом M1-1, синтезується пептид з α-донорською активністю. Зроблено оцінку кількості злитого білка на різних стадіях росту клітинної культури, інфікованої фагом М1-1.Посилання
Löwenadler B, Jansson B, Paleus S, Holmgren E, Nilsson B, Moks T, Palm G, Josephson S, Philipson L, Uhlén M. A gene fusion system for generating antibodies against short peptides. Gene. 1987;58(1):87-97.
Struck DK, Maratea D, Young R. Purification of hybrid beta-galactosidase proteins encoded by phi X174 E phi lacZ and Escherichia coli prlA phi lacZ: a general method for the isolation of lacZ fusion polypeptides produced in low amounts. J Mol Appl Genet. 1985;3(1):18-25.
Paton EB, Zhyvoloup AN. Chimeric rpoC'- lacZ' gene of the recombinant pUC19 plasmid reserving the β-galactosidase activity in Escherichia coli cells. Biopolym. Cell. 1987; 3(5):276-9.
Petrenko VA, Tat'kov SI, Semenova LN, Il'ichev AA, Pozdniakov PI. Expression in Escherichia coli of the human leukocyte interferon alpha2 gene fused with N-terminal fragment of beta-galactosidase. Mol Gen Mikrobiol Virusol. 1988;(4):37-41.
Close TJ, Christmann JL, Rodriguez RL. M13 bacteriophage and pUC plasmids containing DNA inserts but still capable of beta-galactosidase alpha-complementation. Gene. 1983;23(2):131-6.
Langley KE, Villarejo MR, Fowler AV, Zamenhof PJ, Zabin I. Molecular basis of beta-galactosidase alpha-complementation. Proc Natl Acad Sci U S A. 1975;72(4):1254-7.
Kovalenko SP, Gorn VV, Karginov VA, Morozov IV, Zarytova VF. Chemico-enzymatic synthesis and cloning of human angiogenin gene in M13mp8 phage. Bioorg Khim. 1988;14(7):910-5.
Landon. Cleavage at aspartyl-prolyl bonds. Methods Enzymol. 1977;47:145-9.
EMBO. EMBL summer course on site directed mutagenesis: Lab. manual. Heidelberg, 1984. 59 p.
Sigma Company Chemical Catalog. 1989. 631 p.
Miller JH. Experiments in molecular genetics. Cold Spring Harbor Laboratory, 1972, 466 p.
