Вивчення рекомбинаційної активності в екстрактах клітин ссавців
DOI:
https://doi.org/10.7124/bc.000258Анотація
Описано безклітинну систему, у якій використовують екстракти ядер мієлобластів людини, клітин HeLa і сім’яників щурів для ініціації рекомбінації між гомологічними плазмідами, що несуть різні мутантні алелі Тс-гена. Інкубація цих плазмід з ядерними екстрактами збільшує частоту Tсr-рекомбінантів з 2,6 · 10–5 до 2,7· 103. Реакція вимагає іонів Mg2+ і не залежить від присутності ATP і dNTP. Крім того, використавши чутливий метод визначення реакції перенесення нитки, ми частково очистили ATP- незалежну рекомбіназную активність з ядерних екстрактів сім’яників щурів. Реакція вимагає гомології між ДНК-субстратами і присутності іонів Mg2+.Посилання
Davies KE, Robson KJ. Molecular analysis of human monogenic diseases. Bioessays. 1987;6(6):247-53.
Anderson WF. Prospects for human gene therapy. Science. 1984;226(4673):401-9.
Maniatis T. Targeting in mammalian cells. Nature. 1985 Sep 19-25;317(6034):205-6.
Marx JL. Gene therapy--so near and yet so far away. Science. 1986;232(4752):824-5.
Lantsov VA. Bacterial RecA protein: a biochemical, genetic and physicochemical analysis. Genetika. 1985;21(9):1413-27.
Cox MM, Lehman IR. Enzymes of general recombination. Annu Rev Biochem. 1987;56:229-62.
Kmiec E, Holloman WK. Homologous pairing of DNA molecules promoted by a protein from Ustilago. Cell. 1982;29(2):367-74.
Kenne K, Ljungquist S. A DNA-recombinogenic activity in human cells. Nucleic Acids Res. 1984;12(7):3057-68.
Hotta Y, Tabata S, Bouchard RA, Piñon R, Stern H. General recombination mechanisms in extracts of meiotic cells. Chromosoma. 1985;93(2):140-51.
Hsieh P, Meyn MS, Camerini-Otero RD. Partial purification and characterization of a recombinase from human cells. Cell. 1986;44(6):885-94.
Cassuto E, Lightfoot LA, Howard-Flanders P. Partial purification of an activity from human cells that promotes homologous pairing and the formation of heteroduplex DNA in the presence of ATP. Mol Gen Genet. 1987;208(1-2):10-4.
Ganea D, Moore P, Chekuri L, Kucherlapati R. Characterization of an ATP-dependent DNA strand transferase from human cells. Mol Cell Biol. 1987;7(9):3124-30.
Kolodner R, Evans DH, Morrison PT. Purification and characterization of an activity from Saccharomyces cerevisiae that catalyzes homologous pairing and strand exchange. Proc Natl Acad Sci U S A. 1987;84(16):5560-4.
Lopez B, Rousset S, Coppey J. Homologous recombination intermediates between two duplex DNA catalysed by human cell extracts. Nucleic Acids Res. 1987;15(14):5643-55.
Eisen A, Camerini-Otero RD. A recombinase from Drosophila melanogaster embryos. Proc Natl Acad Sci U S A. 1988;85(20):7481-5.
Fishel RA, Detmer K, Rich A. Identification of homologous pairing and strand-exchange activity from a human tumor cell line based on Z-DNA affinity chromatography. Proc Natl Acad Sci U S A. 1988;85(1):36-40.
McCarthy JG, Sander M, Lowenhaupt K, Rich A. Sensitive homologous recombination strand-transfer assay: partial purification of a Drosophila melanogaster enzyme and detection of sequence effects on the strand-transfer activity of RecA protein. Proc Natl Acad Sci U S A. 1988;85(16):5854-8.
Sugino A, Nitiss J, Resnick MA. ATP-independent DNA strand transfer catalyzed by protein(s) from meiotic cells of the yeast Saccharomyces cerevisiae. Proc Natl Acad Sci U S A. 1988;85(11):3683-7.
Maniatis T., Fritsch E. F., Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab. press, 1982 545 p.
DNA Cloning. First edition. Ed. D. Glover. Oxford, IRL Press, 1985; 245 p.
Kalb VF Jr, Bernlohr RW. A new spectrophotometric assay for protein in cell extracts. Anal Biochem. 1977;82(2):362-71.
Symington LS, Fogarty LM, Kolodner R. Genetic recombination of homologous plasmids catalyzed by cell-free extracts of Saccharomyces cerevisiae. Cell. 1983;35(3 Pt 2):805-13.
Darby V, Blattner F. Homologous recombination catalyzed by mammalian cell extracts in vitro. Science. 1984;226(4679):1213-5.
Kucherlapati RS, Spencer J, Moore PD. Homologous recombination catalyzed by human cell extracts. Mol Cell Biol. 1985;5(4):714-20.
