Виділення треоніл-тРНК синтетази з Тhermus thermophilus
DOI:
https://doi.org/10.7124/bc.0000B0Анотація
Описано метод виділення високоочищеного препарату треоніл-тРНК синтетази з Т. thermophilus. У процесі виділення треоніл-тРНК синтетази використано висолювання сульфатом амонію, хроматографію на ДЕАЕ-сефарозі, оксиапатиті, гепарин-сефарозі і гідрофобну хроматографію на полівініловому сорбенті Тоуореагl Нw-65. Вихід очищеного ферменту становив 9 мг на 1 кг клітин Т. thermophilus. Треоніл-тРНК синтетаза є димером α2-типу. Молекулярна маса ферменту становить 148000.Посилання
Grunberg-Manago M. Regulation of the expression of aminoacyl-tRNA synthetases and translation factors. E. coli and S. typhimurium: cellular and molecular biology. Eds J. L. Ingraham et al. Washington, 1987:1386-1409.
Hedrick JL, Smith AJ. Size and charge isomer separation and estimation of molecular weights of proteins by disc gel electrophoresis. Arch Biochem Biophys. 1968;126(1):155-64.
Weber K, Osborn M. The reliability of molecular weight determinations by dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. J Biol Chem. 1969;244(16):4406-12.
Hennecke H, Bock A, Thomale J, Nass G. Threonyl-transfer ribonucleic acid synthetase from Escherichia coli: subunit structure and genetic analysis of the structural gene by means of a mutated enzyme and of a specialized transducing lambda bacteriophage. J Bacteriol. 1977;131(3):943-50.
Yamada H. Rapid purification of threonyl-tRNA synthetase from Saccharomyces carlsbergensis by affinity elution from phosphocellulose. J Biochem. 1978;83(6):1583-9.
