Цілеспрямований мутагенез і експресія мутантного гена лізоциму фага Т4
DOI:
https://doi.org/10.7124/bc.00009BАнотація
У відповідності до ідеї «щеплення» активного центра ферменту на поверхню іншого білка отримано мутантний білок – лізоцим бактеріофага Т4 з очікуваними замінами Аsp10 → Ніs10, Аsn101 → Аsp101, Аrg148 → Ser148, які, імовірно, імітують активний центр серинової протеази.Посилання
Leatherbarrow RJ, Fersht AR. Protein engineering. Protein Eng. 1986;1(1):7-16.
Finkelstein AV. Is it possible to graft an «alien» active site on a protein globule? Biopolym. Cell. 1989; 5(1):89-93.
Owen JE, Schultz DW, Taylor A, Smith GR. Nucleotide sequence of the lysozyme gene of bacteriophage T4. Analysis of mutations involving repeated sequences. J Mol Biol. 1983;165(2):229-48.
Kunkel TA. Rapid and efficient site-specific mutagenesis without phenotypic selection. Proc Natl Acad Sci U S A. 1985;82(2):488-92.
Kramer W, Schughart K, Fritz HJ. Directed mutagenesis of DNA cloned in filamentous phage: influence of hemimethylated GATC sites on marker recovery from restriction fragments. Nucleic Acids Res. 1982;10(20):6475-85.
Taylor JW, Ott J, Eckstein F. The rapid generation of oligonucleotide-directed mutations at high frequency using phosphorothioate-modified DNA. Nucleic Acids Res. 1985;13(24):8765-85.
Zoller MJ, Smith M. Oligonucleotide-directed mutagenesis using M13-derived vectors: an efficient and general procedure for the production of point mutations in any fragment of DNA. Nucleic Acids Res. 1982;10(20):6487-500.
Perry LJ, Heyneker HL, Wetzel R. Non-toxic expression in Escherichia coli of a plasmid-encoded gene for phage T4 lysozyme. Gene. 1985;38(1-3):259-64.
