Трансформація клітин дріжджів плазмідною ДНК з використанням хелатуючих агентів. Про роль перекисного окиснення ліпідів у індукції компетентності у дріжджів
DOI:
https://doi.org/10.7124/bc.000022Анотація
Виявлено, що попередня обробка клітин дріжджів Sacсharomices cerevisiae (штами 746 і LL-20) хелатуючими агентами перехідних металів (8-оксихінолін, 1,10-фенантролін) призводить до появи у них компетентності до трансформації плазмідної ДНК. Вивчено фактори, що впливають на ефективність трансформації дріжджів з використанням 8-оксихіноліну та дворепліконної плазміди RВ4. Вихід трансформантів при використанні даного методу, як правило, досягав 4 ·103–2 ·104 трансформантів на 10 мкг плазмідної ДНК. Показано, що хелатори стимулюють перекисне окиснення ліпідів у дріжджів. Присутність інгібітора окиснення ліпідів ? синтетичного антиоксиданту іонолу в момент обробки клітин 8-оксихіноліном призводить до різкого зниження виходу трансформантів. Отримані дані свідчать про те, що дія хелатора на здатність дріжджів до трансформації опосередкована їхнім впливом на перекисне окиснення мембранних ліпідів.Посилання
Beggs JD. Transformation of yeast by a replicating hybrid plasmid. Nature. 1978;275(5676):104-9.
Ito H, Fukuda Y, Murata K, Kimura A. Transformation of intact yeast cells treated with alkali cations. J Bacteriol. 1983;153(1):163-8. MID: 6336730
Berzhinskene IaA, ZiZaite LIu, Baronaite ZA, Grinius LL. Energy supply for transport of plasmid R 100-1 during conjugation of Escherichia coli cells. Biokhimiia. 1980;45(6):1103-12.
Vladimirov Yu A., Archakov AI Lipid peroxidation in biological membranes. Moscow: Nauka, 1972. 252.
Free radical oxidation of lipids in biological membranes. P. Kozlov, V. Danilov, VE Kagan, MV Sitkovsky. Moscow: Izd. University Press, 1972. 88.
Burlakov EB, Alesenko AV, Molochkina EM. bioantioxidants in radiation injury and cancer growth. Moscow: Nauka, 1975. 214.
Biochemistry of lipids and their role in metabolism. Ed. SE Severin. Moscow: Nauka, 1981. 168.
Wills ED. Mechanisms of lipid peroxide formation in tissues. role of metals and haematin proteins in the catalysis of the oxidation unsaturated fatty acids. Biochim Biophys Acta. 1965;98:238-51.
Botstein D, Falco SC, Stewart SE, Brennan M, Scherer S, Stinchcomb DT, Struhl K, Davis RW. Sterile host yeasts (SHY): a eukaryotic system of biological containment for recombinant DNA experiments. Gene. 1979;8(1):17-24.
Storms RK, McNeil JB, Khandekar PS, An G, Parker J, Friesen JD. Chimeric plasmids for cloning of deoxyribonucleic acid sequences in Saccharomyces cerevisiae. J Bacteriol. 1979;140(1):73-82.
Stal'naya I. D. Method for determining diene conjugation of unsaturated higher fatty acids. In the book.: Modern methods in biochemistry. Ed. Orekhovich. M.: Medical, 1977, p. 63-64.
Mintz PI. Kononenko EV Liquid crystals in biological systems. VINITI (Results of Science and Technology. Biofizika 13)., 1982. 150.
van Die I, van Osterhout A, H Bergmans, Hoekstra W. The influence of phase transition of membrane lipids on uptake of plasmid DNA in Escherichia coli transformation. FEMS Microbiology Letters. 1983; 18(1-2):127-130
van Die IM, Bergmans HE, Hoekstra WP. Transformation in Escherichia coli: studies on the role of the heat shock in induction of competence. J Gen Microbiol. 1983;129(3):663-70.
