Застосування методу ДНК-комет для визначення генотоксичності препаратів ветеринарних вакцин
DOI:
https://doi.org/10.7124/bc.000157Ключові слова:
генотоксичність, ветеринарні вакцини, культури клітин, метод лужного гель-електрофорезу ізольованих клітин, біобезпекаАнотація
Мета. Вивчити можливість застосування методу лужного гель-електрофорезу (методу ДНК-комет) для визначення генотоксичних властивостей ветеринарних вакцин. Методи. Використано метод лужного гель-електрофорезу ізольованих еукаріотних клітин з наступною візуалізацією досліджуваних препаратів за допомогою флуоресцентної мікроскопії. Результати. Тестуванням ветеринарних вакцин методом ДНК-комет за лужних умов виявлено, що двом зразкам вакцин із 12 досліджених (№ 1 та № 12) притаманна генотоксична дія стосовно тестових еукаріотних клітин культур СНО-К1 і Vero. При цьому зразок № 12 демонструє генотоксичні властивості лише за умови його тестування в системі метаболічної активації. Висновки. Метод лужного гель-електрофорезу ізольованих клітин (ДНК-комет) є придатним для визначення генотоксичного впливу ветеринарних вакцин на тестові еукаріотні клітини СНО-К1. Перевагами пропонованого методу є його експресність, низька вартість проведення досліджень і висока прогностичність отриманих результатів. Виконаний комплекс експериментальних робіт дозволяє рекомендувати зазначений метод для характеристики біобезпеки препаратів ветеринарних вакцин.Посилання
Collins A. R. The comet assay for DNA damage and repair: principles, applications and limitations Mol. Biotechnol 2004 26, N 3:249–261.
Methods in molecular biology. In situ detection of DNA damage. Methods and protocols. Ed. V. V. Didenko Totowa: Humana press, 2002 Vol. 203 279 p.
Henderson L., Wolfreys A., Fedyk J., Bourner C., Windebank S. The ability of the Comet assay to discriminate between genotoxins and cytotoxins Mutagenesis 1998 13, N 1:89–94.
Tice R. R., Aqurell E., Anderson D. Single cell gel/comet assay: guadelines for in vitro and in vivo genetic toxicology testing Environ. Mol. Mutagen. 2000 35, N 3:206–221.
Olive P. L. The comet assay: An overview of techniques Meth. Mol. Biol 2002 203:179–194.
Application of alkaline gel electrophoresis of isolated cells to assess the genotoxic properties of natural and synthetic compounds: Methodical recommendations Moscow, 2006 27 p.
Singh N. P., McCoy M. T., Tice R. R., Schneide E. L. A simple technique for quantitation of low levels of DNA damage in individual cells Exp. Cell Res 1988 175, N 1:184–191
Lakin G. F. Biometrics: Appliances for biol. special. institute . 4th ed Moscow: High school, 1990 352 p.
