Перенесення і транзиторна експресія гена тимідинкінази HSV-I у складі реконструйованих вірусоподібних і нуклеопротеїдних комплексів у клітинах печінки
DOI:
https://doi.org/10.7124/bc.0001F2Анотація
Ген тимідинкінази (tk) вірусу HSV-I включений у преформовану капсиду вірусу поліоми і в складі отриманих стабільних штучних вірусоподібних частинок (ІВЧ) внутрішньовенно введений щурам масою 30 г. Проведено електрофоретичний аналіз індукованої в клітинах печінки активності tk HSV-I. Одночасно проведено гібридизаційний (за Саузерном) аналіз ДНК цілих клітин і очищених ядер гепатоцитів, ендотеліальних і Купферовських клітин для виявлення гена tk HSV-I. Отриманий результат свідчить, що ІВЧ порівняно з Са-преципітатом і нуклеопротеїдними комплексами більш ефективні у перенесенні in vivo гена tk в ядра печінки і в індукції вираженої транзиторної активності tk. Глюкокортикоїди інгібують транспорт вивчених комплексів в ендотеліальні, Купферовські клітини і стимулюють їхній транспорт у гепатоцити.Посилання
Slilaty SN, Aposhian HV. Gene transfer by polyoma-like particles assembled in a cell-free system. Science. 1983;220(4598):725-7.
Barr SM, Keck K, Aposhian HV. Cell-free assembly of a polyoma-like particle from empty capsids and DNA. Virology. 1979;96(2):656-9.
Aposhian HV, Zakharian RA. Assembly of a polyoma-like particle from empty capsids and DNA in a cell-free system. Adv Enzyme Regul. 1980;18:275-87.
Zakharyan PA, Gasparyan EG, Aposhyan VG. Transport gene B-lactamase in the composition of artificial virus-like particles in human cells, and its expression. Biol Zh Armenii. 1982; 35(9):730-4.
Capecchi MR. High efficiency transformation by direct microinjection of DNA into cultured mammalian cells. Cell. 1980;22(2 Pt 2):479-88.
Kirby KS. A new method for the isolation of deoxyribonucleic acids; evidence on the nature of bonds between deoxyribonucleic acid and protein. Biochem J. 1957. 66(3):495-504.
Southern EM. Detection of specific sequences among DNA fragments separated by gel electrophoresis. J Mol Biol. 1975;98(3):503-17.
Pellicer A, Wigler M, Axel R, Silverstein S. The transfer and stable integration of the HSV thymidine kinase gene into mouse cells. Cell. 1978;14(1):133-41.
Munthe-Kaas AC, Seglen PO. The use of Metrizamide as a gradient medium for isopycnic separation of rat liver cells. FEBS Lett. 1974;43(3):252-6.
Brehm SP, Hoch SO, Hoch JA. DNA-binding proteins in human serum. Biochem Biophys Res Commun. 1975;63(1):24-31.
Laskey RA, Honda BM, Mills AD, Finch JT. Nucleosomes are assembled by an acidic protein which binds histones and transfers them to DNA. Nature. 1978;275(5679):416-20.
Cheng YC, Ostrander M. Deoxythymidine kinase induced in HeLa TK- cells by herpes simplex virus type I and type II. II. Purification and characterization. J Biol Chem. 1976;251(9):2605-10.
Olashaw NE, Kress ED, Cristofalo VJ. Thymidine triphosphate synthesis in senescent WI38 cells. Relationship to loss of replicative capacity. Exp Cell Res. 1983;149(2):547-54.
Wigler M, Silverstein S, Lee LS, Pellicer A, Cheng Yc, Axel R. Transfer of purified herpes virus thymidine kinase gene to cultured mouse cells. Cell. 1977;11(1):223-32.
Zakharyan P. A. Gene transport in vivo and its regulation by glucocorticoids. Structure and transcription of the genome: Proc. of reports. IV symposium. USSR-FRG Yerevan, 1981:19.
Qasba PK, Aposhian HV. DNA and gene therapy: transfer of mouse DNA to human and mouse embryonic cells by polyoma pseudovirions. Proc Natl Acad Sci U S A. 1971;68(10):2345-9.
