Лейцил-тРНК синтетаза із Thermus thermophilus. Очищення і деякі властивості кристалів ферменту
DOI:
https://doi.org/10.7124/bc.0005ADАнотація
Лейцил-тРНК синтетазу із Thermus thermophilus (ЛейРСТТ) виділено в гомогенному стані з використанням п'яти стадій очищення. Фермент охарактеризовано та отримано його кристали. Визначено молекулярну масу нативного і денатурованого білка. Встановлено, що ЛейРСТТ являє собою мономер з молекулярною масою 101 кДа. Отриманому ферментові притаманна значна термостабільність і він зберігає 97 % аміноацилюючої активності після інкубації протягом 1 год при температурі 88 ° С Кристали ЛейРСТТ одержано методом дифузії парів із використанням як осаджувана розчину сульфату амонію.Посилання
Jakubowski H, Goldman E. Editing of errors in selection of amino acids for protein synthesis. Microbiol Rev. 1992;56(3):412-29.
Lin L, Hale SP, Schimmel P. Aminoacylation error correction. Nature. 1996;384(6604):33-4.
Eriani G, Delarue M, Poch O, Gangloff J, Moras D. Partition of tRNA synthetases into two classes based on mutually exclusive sets of sequence motifs. Nature. 1990;347(6289):203-6.
Cusack S, Berthet-Colominas C, H?rtlein M, Nassar N, Leberman R. A second class of synthetase structure revealed by X-ray analysis of Escherichia coli seryl-tRNA synthetase at 2.5 A. Nature. 1990;347(6290):249-55.
Asahara H, Himeno H, Tamura K, Hasegawa T, Watanabe K, Shimizu M. Recognition nucleotides of Escherichia coli tRNA(Leu) and its elements facilitating discrimination from tRNASer and tRNA(Tyr). J Mol Biol. 1993;231(2):219-29.
Cusack S. Eleven down and nine to go. Nat Struct Biol. 1995;2(10):824-31.
Arnez JG, Moras D. Structural and functional considerations of the aminoacylation reaction. Trends Biochem Sci. 1997;22(6):211-6.
Martinis SA, Plateau P, Cavarelli J, Florentz C. Aminoacyl-tRNA synthetases: a new image for a classical family. Biochimie. 1999;81(7):683-700.
Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970;227(5259):680-5.
Chen J, Li Y, Wang E, Wang Y. High-level expression and single-step purification of leucyl-tRNA synthetase from Escherichia coli. Protein Expr Purif. 1999;15(1):115-20.
Mazauric MH, Reinbolt J, Lorber B, Ebel C, Keith G, Gieg? R, Kern D. An example of non-conservation of oligomeric structure in prokaryotic aminoacyl-tRNA synthetases. Biochemical and structural properties of glycyl-tRNA synthetase from Thermus thermophilus. Eur J Biochem. 1996;241(3):814-26.
