Відбір чутливих до бактеріофага λ клонів із стійкого до нього штаму Escherichia coli
DOI:
https://doi.org/10.7124/bc.0005A7Анотація
Теоретично сформульовано та експериментально апробовано метод селекції чутливих до фага λ клонів із популяції кліринстійких до бактеріофага λ, за допомогою фага λcI857ApRTcR . Стійкий до фага λ штам Е. coli інфікували фагом λ, який привносить у клітину маркери антибіотикостійкості. На селективному середовищі було відібрано клони, чутливі до фага λ vir, які лізують при температурі 43 °C. Частота виникнення таких клітин у популяції складає 10–6 . Наявність ts-мутації в сI-гені фага дозволила при вирощуванні у неселективних умовах і при підвищеній температурі які несуть цей фаг, вилікувати клітини від фага λcI857ApRTcR та одержати чутливі до фага λ клони, що походять від вихідного нечутливого штаму Е. coli. Метод також може бути використаний для популяційних оцінок гетерогенності популяцій λ за даною ознакою.Посилання
Moir A, Brammar WJ. The use of specialised transducing phages in the amplification of enzyme production. Mol Gen Genet. 1976;149(1):87-99.
Drew RE, Clarke PH, Brammar WJ. The construction in vitro of derivatives of bacteriophage lambda carrying the amidase genes of Pseudomonas aeruginosa. Mol Gen Genet. 1980;177(2):311-20.
AS. USSR N 1593232 Al. A method of producing ?-galactosidase. VA Kordyum, SI Chernykh, IYu Slavchenko, VG Korobko. 15.05.1990.
Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab, 1982; 545 p.
Slavchenko IIu, Chernykh SI, Kordium VA. [The use of the mutant phage lambda cI857 ApRTcRN- for isolation of cells lacking the prophage lambda]. Mol Gen Mikrobiol Virusol. 1985;(11):42-4.
Pat. USA 4,784,952. Conferred susceptibility to lambda phage in non-coliform prokaryotic hosts. Robert A. Ludwig, Gert E. de Vries. Publ. 15.11.88.
Chernykh SI, Stel'mashenko LN, Kordium VA. [Characteristics of the expression of the Ap- and Tc-genes of plasmid origin in lambda vectors]. Genetika. 1984;20(3):382-8.
Kravchenko VV, Guileva IP, Shamin VV, Kulichkov VA, Dobrynin VN, Filippov SA, Chuvpilo SA, Korobko VG. Construction of a tandem of artificial genes encoding human leukocyte interferon and its expression as a part of polycistronic template with coupled translation. Bioorg Khim. 1987; 13 (9):1186-93.
Kashyap SK, Bystrov NS, Boldyreva EF, Polyakova IA, Severtsova IV, Korobko VG. Chemical-enzymatic synthesis and cloning in Escherichia coli of genes coding for human granulocyte colony stimulating. Bioorg Khim. 1992; 18(1):71-7
