Виділення сайт-специфічної ендонуклеази Streptomyces sp. 48

Автор(и)

  • В. В. Лук'янчук Інститут мікробіології і вірусології ім. Д. К. Заболотного НАН України вул. Академіка Заболотного, 154, Київ, Україна, 03680 Автор
  • С. М. Суханов Інститут мікробіології і вірусології ім. Д. К. Заболотного НАН України вул. Академіка Заболотного, 154, Київ, Україна, 03680 Автор
  • Л. В. Поліщук Інститут мікробіології і вірусології ім. Д. К. Заболотного НАН України вул. Академіка Заболотного, 154, Київ, Україна, 03680 Автор
  • Б. П. Мацелюх Інститут мікробіології і вірусології ім. Д. К. Заболотного НАН України вул. Академіка Заболотного, 154, Київ, Україна, 03680 Автор

DOI:

https://doi.org/10.7124/bc.000597

Анотація

Розроблено метод виділення і очищення сайт-специфічної ендонуклеази рестрикції II типу Streptomyces sp. 48. Було встановлено, що в лізаті міцелію штаму Streptomyces sp. 48 міститься тільки один фермент, який має сайт-специфічну ендонуклеазну активність. Максимальну елюцію ферменту зареєстровано при значенні іонної сили 350 мМ NaCL Представлений метод забезпечує достатнє очищення і концентрування ферменту із збереженням специфічної активності.

Посилання

Luk'ianchuk VV, Polishchuk LV, Stryzhkova HM, Kopie?ko OP, Matseliukh BP. The determination of the site specificity of type-II restriction endonuclease in Streptomyces sp. 48. Mikrobiol Z. 1999;61(1):80-3.

Okanishi M, Suzuki K, Umezawa H. Formation and reversion of Streptomycete protoplasts: cultural condition and morphological study. J Gen Microbiol. 1974;80(2):389-400.

Azeddoug H, Hubert J, Reysset G. Characterization of a methyl-specific restriction system in Clostridium acetobutylicum strain N1-4081. FEMS Microbiol Lett. 1989;53(3):323-6.

Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem. 1976;72:248-54.

Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab, 1982; 545 p.

Luk'ianchuk VV, Stryzhkova HM, Polishchuk LV, Kopie?ko OP, Matseliukh BP. A search for site-specific type-II restriction endonucleases in streptomycetes. Mikrobiol Z. 1998;60(4):33-5.

Belavin PA, Dedkov VS, Degtiarev SKh. A method for detecting restriction endonucleases in bacterial colonies. Prikl Biokhim Mikrobiol. 1988;24(1):121-4.

Завантаження

Опубліковано

2000-11-20

Номер

Розділ

Молекулярна та клітинна біотехнології