Експресія плазміди pEGFP у гепатоцитах мишей in vivo

Автор(и)

  • С. П. Шпилєва Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680 Автор
  • В. І. Андрієнко Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680 Автор
  • О. К. Топорова Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680 Автор
  • Г. С. Єлисєєва Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680 Автор
  • Ф. Аджаміян Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680 Автор
  • Л. Г. Жарова Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680 Автор
  • Л. І. Лихачева Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680 Автор
  • В. А. Кордюм Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680 Автор

DOI:

https://doi.org/10.7124/bc.000520

Анотація

Досліджено експресію гена GFP in vivo в гепатоцитах мишей. Як векторну молекулу використано транзиторну плазміду pEGFP-Cl, яку у складі ліпосом вводили безпосередньо в печінку тварин. Підібрано умови, коректного тестування напрацьованого білка GFP, які виключали можливість появи артефактного свічення в живих гепатоцитах. Зелений флюоресціюючий білок GFP був ідентифікований у цитоплазмі гепатоцитів мишей через 6, 17, 24 год і до 7 діб включно після введення матеріалу в орган.

Посилання

Morin JG, Hastings JW. Energy transfer in a bioluminescent system. J Cell Physiol. 1971;77(3):313-8.

Prasher DC, Eckenrode VK, Ward WW, Prendergast FG, Cormier MJ. Primary structure of the Aequorea victoria green-fluorescent protein. Gene. 1992;111(2):229-33.

Vanden Wymelenberg AJ, Cullen D, Spear RN, Schoenike B, Andrews JH. Expression of green fluorescent protein in Aureobasidium pullulans and quantification of the fungus on leaf surfaces. Biotechniques. 1997;23(4):686-90.

Bokman SH, Ward WW. Renaturation of Aequorea gree-fluorescent protein. Biochem Biophys Res Commun. 1981;101(4):1372-80.

Wang J, Holden DW, Leong SA. Gene transfer system for the phytopathogenic fungus Ustilago maydis. Proc Natl Acad Sci U S A. 1988;85(3):865-9.

Chalfie M, Tu Y, Euskirchen G, Ward WW, Prasher DC. Green fluorescent protein as a marker for gene expression. Science. 1994;263(5148):802-5.

Heim R, Cubitt AB, Tsien RY. Improved green fluorescence. Nature. 1995;373(6516):663-4.

Zhang G, Gurtu V, Kain SR. An enhanced green fluorescent protein allows sensitive detection of gene transfer in mammalian cells. Biochem Biophys Res Commun. 1996;227(3):707-11.

Heim R, Prasher DC, Tsien RY. Wavelength mutations and posttranslational autoxidation of green fluorescent protein. Proc Natl Acad Sci U S A. 1994;91(26):12501-4.

Sheen J, Hwang S, Niwa Y, Kobayashi H, Galbraith DW. Green-fluorescent protein as a new vital marker in plant cells. Plant J. 1995;8(5):777-84.

Kostetsky IE, Shpilevaya SP, Likhacheva LI, Zharova LC, Irodov DM, Kirillova VS, Kordium VA. Expression of Escherichia coli b-Galactosidase in murine hepatocytes. Biopolym. Cell. 1989; 5(2):51-58

Bilich KM, Irodov DM, Kordium VA. Some ultrastructural aspects of direct injection of liposomes with inclosed plasmid DNA into mice liver. Biopolym. Cell, 1990;6(1):73-82

Seglen PO. Effects of amino acids, ammonia and leupeptin on protein synthesis and degradation in isolated rat hepatocytes. Biochem J. 1978;174(2):469-74.

Ugolev AT, Luk'yanova LD, Dudchenko AM. Obtaining isolated hepatocytes and the general characteristics of their functional-metabolic status. Hepatocyte. Functional-metabolic properties. Nauka. 1985. Pp. 9-37.

Benvenisty N, Reshef L. Direct introduction of genes into rats and expression of the genes. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83(24):9551-5.

Завантаження

Опубліковано

1999-05-20

Номер

Розділ

Генно-інженерна біотехнологія