Biopolym. Cell. 2017; 33(3):172-182.
Структура и функции биополимеров
Роль экспонированного актина в связывании плазминогена на мембране агонист-активированных тромбоцитов: цитометрическое исследование
1Тихомиров А. А., 1Жерносеков Д. Д., 1Гриненко Т. В.
  1. Институт биохимии имени А. В. Палладина НАН Украины
    ул. Леонтовича, 9, Киев, Украина, 01601

Abstract

Цель. Выяснить способность актина, который экспонируется на поверхности тромбоцитов, активированных раз-личными агонистами, связывать плазминоген. Методы. Отмытые тромбоциты человека получали с помощью гель-фильтрации на Сефарозе-2В. Количественную оценку экспонирования актина на внешней поверхности интактных тромбоцитов и тромбоцитов, активированных тромбином или коллагеном, проводили с использованием про-точной цитометрии. Связывание флуоресцентного конъюгата плазминоген-FITC (Pg-FITC) с тромбоцитами, обра-ботанными антителами против актина или неимунными IgG (контроль), анализировали цитометрически. Результаты. Влияние тромбина и коллагена приводило к появлению на внешней стороне плазматической мембраны тромбоцитов актина, количество которого зависело от концентрации агонистов. Предварительная обработка активированных тромбоцитов специфическими антителами против актина в значительной степени предотвращала связывание Pg-FITC с поверхностью тромбоцитов. Выводы. Результаты представленного исследования указывают на вовлечение экспонированного актина в связывание плазминогена на поверхности тромбоцитов, стимулированных различными агонистами.
Keywords: тромбоциты, экспонированный актин, плазминоген, проточная цитометрия

References

[1] Yun SH, Sim EH, Goh RY, Park JI, Han JY. Platelet activation: the mechanisms and potential biomarkers. Biomed Res Int. 2016;2016:9060143.
[2] Tschoepe D, Spangenberg P, Esser J, Schwippert B, Kehrel B, Roesen P, Gries FA. Flow-cytometric detection of surface membrane alterations and concomitant changes in the cytoskeletal actin status of activated platelets. Cytometry. 1990;11(5):652-6.
[3] Podor TJ, Singh D, Chindemi P, Foulon DM, McKelvie R, Weitz JI, Austin R, Boudreau G, Davies R. Vimentin exposed on activated platelets and platelet microparticles localizes vitronectin and plasminogen activator inhibitor complexes on their surface. J Biol Chem. 2002;277(9):7529-39.
[4] Tykhomyrov AA. Dynamics of thrombin-induced exposition of actin on the platelet surface. Ukr Biochem J. 2014;86(5):74-81.
[5] Castellino FJ, Ploplis VA. Structure and function of the plasminogen/plasmin system. Thromb Haemost. 2005;93(4):647-54.
[6] Whyte CS, Swieringa F, Mastenbroek TG, Lionikiene AS, Lancé MD, van der Meijden PE, Heemskerk JW, Mutch NJ. Plasminogen associates with phosphatidylserine-exposing platelets and contributes to thrombus lysis under flow. Blood. 2015;125(16):2568-78.
[7] Wang H, Doll JA, Jiang K, Cundiff DL, Czarnecki JS, Wilson M, Ridge KM, Soff GA. Differential binding of plasminogen, plasmin, and angiostatin4.5 to cell surface beta-actin: implications for cancer-mediated angiogenesis. Cancer Res. 2006;66(14):7211-5.
[8] Miles LA, Hawley SB, Parmer RJ. Chromaffin cell plasminogen receptors. Ann N Y Acad Sci. 2002;971:454-9.
[9] Sudakov NP, Klimenkov IV, Byvaltsev VA, Nikiforov SB, Konstantinov YM. Extracellular actin in health and disease. Biochemistry (Mosc). 2017;82(1):1-12.
[10] Tykhomyrov AA. Interaction of actin with plasminogen/plasmin system: mechanisms and physiological role. Biopolym Cell. 2012;28(6):413-23.
[11] Smalheiser NR. Proteins in unexpected locations. Mol Biol Cell. 1996;7(7):1003-14.
[12] Liu DY, Clarke GN, Baker HW. Exposure of actin on the surface of the human sperm head during in vitro culture relates to sperm morphology, capacitation and zona binding. Hum Reprod. 2005;20(4):999-1005.
[13] Miles LA, Andronicos NM, Baik N, Parmer RJ. Cell-surface actin binds plasminogen and modulates neurotransmitter release from catecholaminergic cells. J. Neurosci. 2006;26(50):13017-24.
[14] Wang H, Schultz R, Hong J, Cundiff DL, Jiang K, Soff GA. Cell surface-dependent generation of angiostatin4.5. Cancer Res. 2004;64(1):162-8.
[15] Deutsch DG, Mertz ET. Plasminogen: purification from human plasma by affinity chromatography. Science. 1970;170(3962):1095-6.
[16] Magalhães V, Andrade EB, Alves J, Ribeiro A, Kim KS, Lima M, Trieu-Cuot P, Ferreira P. Group B streptococcus hijacks the host plasminogen system to promote brain endothelial cell invasion. PLoS One. 2013; 8(5):63244.
[17] Schoenfeld H, Muhm M, Doepfmer U, Exadaktylos A, Radtke H. Platelet activity in washed platelet concentrates. Anesth. Analg. 2004; 99(1): 17-20.
[18] Takada Y. Potential role of kringle-integrin interaction in plasmin and uPA actions (a hypothesis). J Biomed Biotechnol. 2012;2012:136302.
[19] Dudani AK, Ben-Tchavtchavadze M, Porter S, Tackaberry E. Angiostatin and plasminogen share binding to endothelial cell surface actin. Biochem Cell Biol. 2005;83(1):28-35.
[20] Sanders S.K., Craig S.W. A lymphocyte cell surface molecule that is antigenically related to actin. J Immunol. 1983;131(1):370-7.
[21] Li GH, Arora PD, Chen Y, McCulloch CA, Liu P. Multifunctional roles of gelsolin in health and diseases. Med Res Rev. 2012;32(5):999-1025.
[22] Hansen MH, Nielsen HV, Ditzel HJ. Translocation of an intracellular antigen to the surface of medullary breast cancer cells early in apoptosis allows for an antigen-driven antibody response elicited by tumor-infiltrating B cells. J Immunol. 2002;169(5):2701-11.
[23] Head BP, Patel HH, Insel PA. Interaction of membrane/lipid rafts with the cytoskeleton: impact on signaling and function: membrane/lipid rafts, mediators of cytoskeletal arrangement and cell signaling. Biochim Biophys Acta. 2014;1838(2):532-45.
[24] Bearer EL, Prakash JM, Li Z. Actin dynamics in platelets. Int Rev Cytol. 2002;217:137-82.
[25] Law RH, Abu-Ssaydeh D, Whisstock JC. New insights into the structure and function of the plasminogen/plasmin system. Curr Opin Struct Biol. 2013;23(6):836-41.
[26] Tykhomyrov A, Zhernosiekov D, Roka-Moĭia I, Diordiieva S, Hrynenko T. Effects of Lys-form of plasminogen on platelet actin cytoskeleton. Fiziol Zh. 2014;60(1):25-33.
[27] Tykhomyrov A, Zhernosekov D, Roka-Moya Y, Diordieva S, Grinenko T. The effects of lys-plasminogen on human platelet secretion. Fiziol Zh. 2015;61(6):26-34.
[28] Zhernossekov D, Roka-Moiia Y, Tykhomyrov A, Guzyk M, Grinenko T. Glu- and Lys-forms of plasminogen differentially affect phosphatidylserine exposure on the platelet surface. Ukr Biochem J. 2017;89(special issue):102-10.
[29] Miles LA, Castellino FJ, Gong Y. Critical role for conversion of glu-plasminogen to Lys-plasminogen for optimal stimulation of plasminogen activation on cell surfaces. Trends Cardiovasc Med. 2003;13(1):21-30.
[30] Radziwon-Balicka A, Moncada de la Rosa C, Zielnik B, Doroszko A, Jurasz P. Temporal and pharmacological characterization of angiostatin release and generation by human platelets: implications for endothelial cell migration. PLoS One. 2013;8(3):e59281.