Biopolymers and Cell. 2011; 27(4): 285-290

 

ХАРАКТЕРИСТИКА НОВОЙ КЛЕТОЧНОЙ ЛИНИИ, СТАБИЛЬНО ЭКСПРЕССИРУЮЩЕЙ ОНКОГЕН CHI3L1

 

Балынская Е. В., 1Баклаушев В. П., Арешков П. А., Авдеев С. С., Бойко О. И., 1Чехонин В. П., Кавсан В. М.

Институт молекулярной биологии и генетики Национальной академии наук Украины
ул. Академика Заболотного 150, Киев, Украина, 03680

1Национальный исследовательский центр социальной и психиатрии имени В.П. Сербского
Кропоткинсая линия 23, Москва, Российская Федерация,

 

  Цель. Охарактеризовать иммортализованную клеточную линию 293 после стабильной трансфекции онкогена CHI3L1. Методы. Клетки 293, стабильно трансфецированные pcDNA3.1_CHI3L1, и клетки 293, стабильно трансфецированные pcDNA3.1 в качестве отрицательного контроля, использованы во всех экспериментах. Клоны 293_CHI3L1 и клетки 293_pcDNA3.1 анализировали методами иммунофлюоресценции и конфокальной микроскопии. Клеточную пролиферацию определяли с помощью MTT, активацию и локализацию ERK1/2 и AKT анализировали с применением анти-фосфо-ERKи анти-фосфо-AKT-антител. Специфическую активацию MAPи PI3-киназ определяли денситометрическим анализом Вестерн-блот сигналов. Результаты. Полученные результаты демонстрируют умеренную способность CHI3L1 стимулировать клеточный рост и отражают скорее повышенную способность к прикреплению клеток, стабильно трансфецированных pcDNA3.1_CHI3L1 по сравнению с 293-клетками, трансфецированными «пустым» вектором. ERK1/2 и AKT в клетках 293_CHI3L1 находятся в активированном состоянии. В этих клетках фосфорилированныe ERK1/2 локализованы как в цитоплазме, так и в ядре, в то время как AKT – только в цитоплазме. Клетки 293_CHI3L1 отличаются от клеток 293_pcDNA3.1 по морфологии и способности прикрепления к культуральным чашкам. Выводы. Сверхэкспрессия CHI3L1, очевидно, имеет важное значение в опухолеобразовании и опосредуется активацией PI3K и MAPK-сигнальных путей. Опухоли, которые индуцируются ортотопической имплантацией трансформированных человеческих клеток со сверхэкспрессированным CHI3L1 в мозг крыс, могут служить мишенью для антираковой терапии.
 
   
Ключевые слова: слова: хитиназа 3-подобный белок 1 (CHI3L1), опухоли гoлoвного мозга, MAP-киназа, PI3-киназа  

 

Резюме на украинском
Резюме на английском