Biopolymers and Cell 1990; 6(1) P 100-103
СРАВНЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ РАННЕГО И ПОЗДНЕГО ПРОМОТОРОВ ФАГА Т7 ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА beta-ГАЛАКТОЗИДАЗЫ В ESCHERICHIA COLI
Л. Г. Глушакова, О. Р. Романовская, В. А. Кордюм
Институт молекулярной биологии и генетики АН УССР
Создана модельная система, позволяющая сравнить эффективность использования раннего и позднего промоторов фага Т7 для экспрессии beta-галактозидазного гена Е. coli. Избрана следующая стратегия конструирования. Ген PHК-полимеразы фага Т7 клонирован в составе ДНК векторного фага lambda, Модельный ген z lас-оперона Е. coli (EcoRI-Sal1-фрагмент pLZ56) клонирован в составе ДНК коммерческой плазмиды GEM-I фирмы «Promega» (USA), содержащей поздний промотор фага Т7. В клонироанном фрагменте сохранены сайты связывания с рибосомами и промотор А3, ранний промотор фага Т7, специфичный для РНК-полимеразы Е. coli. Приведены закономерности синтеза beta-галактозидазы при транскрипции z-гена как с позднего промотора фага Т7, так и с промотора А3. |
|